- алгоритм 6 определение группы крови со стандартными сыворотками
- алгоритм 7 определение группы крови с цоликлонами
- Техника определения группы крови системы АВ0 стандартными сыворотками
- Определение группы крови цоликлонами
- Методика проведения анализа
- Результаты реакции
- Определение группы крови
- Определение группы крови и резус-фактора
- Показания к исследованию
- Подготовка к исследованию
- Методы определения группы крови
- Стандартный метод
- Метод перекрестной реакции
- Определение группы крови цоликлонами
- Определение резус-фактора
- Резус-фактор: отрицательный и положительный
- Правила расшифровки результатов
алгоритм 6 определение группы крови со стандартными сыворотками
Определение группы крови с помощью стандартных парных изогемагглютинирующих сывороток.
1Вступительное слово: Мы проводим определение группы крови со стандартными сыворотками в процедурном кабинете по назначению врача. На мне шапочка, очки, маска, халат, фартук, перчатки. Руки предварительно обработаны гигиеническим способом.
Стандартные сыворотки двух серий
Исследуемая кровь в пробирке
Тарелка для определения группы крови.
Четыре стерильных стеклянных палочки (в стакане, чашке Петри)
Изотонический раствор хлорида натрия (пробирка)
Стерильные пипетки 2 шт.
Ёмкость с 3% раствором хлорамина.
3 Проведение манипуляции
Внести по капле (0,1 мл) стандартных сывороток в отдельные лунки.
Внести на тарелку большую каплю крови рядом с лункой 4й группы, на расстоянии не менее 1 см от нее.
Отдельными концами стеклянных палочек внести кровь в сыворотки (соотношение 10:1), смешать
Покачивать тарелку 5 мин, наблюдать агглютинацию.
В лунки, в которых произошла агглютинация добавить физиологический раствор (0,1 мл)
Покачивать тарелку, наблюдать агглютинацию.
При определении группы крови со стандартными сыворотками
Агглютинация не наблюдается ни в одной из лунок – первая группа
Агглютинация наблюдается в первой и третьей лунках – вторая группа
Агглютинация наблюдается в первой и второй лунках – третья группа
Агглютинация наблюдается во всех лунках – вероятно четвертая группа
Определяем результат с сывороткой четвертой группы (аналогично)
С сывороткой четвертой группы агглютинация не наблюдается – четвертая группа
С сывороткой четвертой группы агглютинация не наблюдается – определить группу крови невозможно, следует заменить сыворотки.
После проведения манипуляции все загрязненные кровью предметы замачиваем в трехпроцентном растворе хлорамина на один час.
4 Возможные ошибки:
Не использование средств защиты медработника.
Повторное использование палочек.
Перенос палочек, контактировавших с кровью над лотком с чистыми палочками.
Не соответствие картины агглютинации заключению о групповой принадлежности.
Не продезинфицированы предметы контактировавшие с кровью
Не грубые ошибки:
Время ожидания агглютинации менее 5 мин.
Не внесен физраствор в лунки, в которых произошла агглютинация.
Удерживание палочек за концы а не за центр.
5 Критерии оценивания:
Сдал – отсутствие грубых ошибок, наличие не более двух не грубых ошибок.
Не сдал – наличие грубых ошибок, наличие более двух не грубых ошибок.
При совершении грубой ошибки преподаватель может попросить повторить соответствующий этап манипуляции. Если ошибка повторяется – не сдал. Допускается не более одного повторения.
Тут вы можете оставить комментарий к выбранному абзацу или сообщить об ошибке.
Источник
алгоритм 7 определение группы крови с цоликлонами
Определение группы крови с цоликлонами анти-А и анти-Б
1Вступительное слово: Мы проводим определение группы крови с цоликлонами в процедурном кабинете по назначению врача. На мне шапочка, очки, маска, халат, фартук, перчатки. Руки предварительно обработаны гигиеническим способом.
Цоликлоны анти-А, анти-Б
Исследуемая кровь (пробирка)
Тарелка для определения группы крови.
Стерильные стеклянные палочки 2 шт ( в стакане, чашке Петри)
Изотонический раствор натрия хлорида
Стерильная пипетка 1 шт.
Стерильный капилляр с грушей.
Ёмкость с 3% раствором хлорамина.
3 Техника манипуляции:
Внести цоликлоны в отдельные лунки по одной большой капле.
Внести капилляром маленькие (0,01 мл) капли крови рядом с каплями цоликлонов, избегая контакта капилляра и крови.
Отдельными палочками смешать цоликлоны и кровь.
Покачивать тарелку, наблюдать агглютинацию 2,5 минуты.
Внести пипеткой в лунки, в которых произошла агглютинация по 1й капле физиологического раствора
Покачивать, наблюдать агглютинацию.
При определении группы крови с помощью цоликлонов …
Агглютинация не наблюдается ни в одной из лунок – первая группа
Агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-А – вторая группа
Агглютинация наблюдается с цоликлоном анти-Б – третья группа
Агглютинация наблюдается с цоликлонами анти-А и анти-Б – четвертая группа
После проведения манипуляции все использованные предметы замачиваются в емкости с трехпроцентным раствором хлорамина.
4 Возможные ошибки:
Не использование средств защиты медработника.
Повторное использование палочек.
Перенос палочек, контактировавших с кровью над лотком с чистыми палочками.
Не соответствие картины агглютинации заключению о групповой принадлежности.
Не продезинфицированы предметы, контактировавшие с кровью.
Не грубые ошибки:
Время ожидания агглютинации менее 2.5 мин.
Не внесен физраствор в лунки, в которых произошла агглютинация.
Удерживание палочек за концы, а не за центр.
5 Критерии оценивания:
Сдал – отсутствие грубых ошибок, наличие не более двух не грубых ошибок.
Не сдал – наличие грубых ошибок, наличие более двух не грубых ошибок.
При совершении грубой ошибки преподаватель может попросить повторить соответствующий этап манипуляции. Если ошибка повторяется – не сдал. Допускается не более одного повторения.
Тут вы можете оставить комментарий к выбранному абзацу или сообщить об ошибке.
Источник
Техника определения группы крови системы АВ0 стандартными сыворотками
Показания: необходимость переливания крови, подготовка к оперативному вмешательств.
Приготовить: стандартную тарелочку с углублениями; набор стеклянных палочек; изотонический раствор хлорида натрия; набор гемагглютинирующих сывороток 1, 2, 3, 4 групп двух серий; пипетки; исследуемую взятую из вены или пальца кровь; часы; лотки; перчатки; емкости для отработанного материала; контейнеры с дезинфицирующими растворами.
Подготовка к манипуляции:
- Медицинская сестра полностью подготовлена к выполнению манипуляции: одета в костюм (халат), маску, перчатки, колпак, сменную обувь.
- Проверить качество стандартных гемагглютинирующих сывороток по: цветовой маркировке, внешнему виду (светлая, прозрачная); сохранность упаковки, наличию правильно оформленной этикетки.
- Подготовить все необходимое для выполнения манипуляции.
Выполнение манипуляции:
— на белую тарелочку, согласно обозначению, последовательно нанести по одной капле сыворотки 1, 2, 3 групп двух серий. Каждую пипетку немедленно опускать в ту же ампулу (флакон) из которых они были взяты;
— с помощью стеклянной палочки нанести рядом с углублениями (6 углублений) по капле исследуемой крови. Капля крови должна быть в 10 раз меньше капли сыворотки;
— отметить время и чистой, сухой стеклянной палочкой перемешать кровь с сывороткой 1 гр., затем другой палочкой 2 гр. и т.д. во всех углублениях;
— по мере наступления агглютинации, но не ранее 3 минуты, в те капли, в которых наступила реакция агглютинации добавить по одной капле изотонического раствора хлорида натрия для исключения ложной агглютинации и продолжать наблюдение в течение 5 минут.
Оценка результатов:
а) при положительной реакции в смеси появляются видимые глазом мельчайшие зернышки, состоящие из склеившихся эритроцитов. Мелкие зерна сливаются в крупные зерна, а иногда в хлопья, сыворотка при этом – обесцвечивается;
б) при отрицательной реакции жидкость остается равномерно окрашенной в розовый цвет;
в) возможны 4 комбинации положительной и отрицательной реакции:
1. Если агглютинации нет ни в одной из ячеек, то кровь I (0) группы.
2. Если агглютинация в первой и третей ячейках, то кровь II (А) группы.
3. Если агглютинация в первой и второй группах, то кровь III (В) группы.
4. Если агглютинация в первой, второй, третей ячейках, то кровь IV (АВ) группы.
Для исключения ошибки проверяют кровь с сывороткой 4 группы, где агглютинации не должно быть.
Окончание манипуляции:
- Снять перчатки, поместить их в дезинфицирующий раствор.
- Вымыть руки, осушить полотенцем.
Примечание: определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15 – 25 0 С.
Источник
Определение группы крови цоликлонами
Методика проведения анализа
Алгоритм определения группы крови AB0 и резус-фактора цоликлонами облегчает и стандартизирует процедуру типирования. Позволяет однозначно интерпретировать результат реакции антиген/антитело. Для каждого исследования по системе AB0 достаточно одной серии реагентов. Объект исследования – цельная кровь, эритроцитарная масса, отмытые эритроциты, клетки крови в сыворотке или физрастворе.
В качестве примера приводим схему проведения типирования крови человека по системе антигенов AB0.
- Обеспечьте яркое освещение помещения и температуру воздуха 15 – 25 °C.
- Промаркируйте лунки планшета: Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
- Добавьте в подписанные лунки по одной капле (приблизительно 0,1 мл) реагентов Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
- Поместите по одной маленькой капле концентрированной эритроцитосодержащей среды (0,01 – 0,03 мл) рядом с большой каплей каждого реагента.
- В каждой из трех лунок отдельной стерильной стеклянной палочкой смешайте моноклональный реагент с кровью.
- Плавно покачивайте планшет 2,5 – 3 минуты. Обычно агглютинация формируется в течение 5 – 10 секунд. Запас времени необходим для обнаружения слабых вариантов антигенов.
- Проведите визуальную оценку результатов реакции в каждой лунке. Результат реакции свидетельствует об обнаружении соответствующего агглютиногена.
Результаты реакции
Таблица результатов типирования крови с помощью цоликлонов.
Групповая принадлежность | Моноклональный реагент | ||
---|---|---|---|
Анти-A | Анти-B | Анти-AB | |
0(I) | — | — | — |
A(II) | + | — | + |
B(III) | — | + | + |
AB(IV) | + | + | + |
«+» — положительный результат реакции;
«-» — отсутствие агглютинации.
- Отрицательный результат реакции во всех трех лунках свидетельствует об отсутствии агглютиногенов. Группа: 0(I).
- Агглютинация с Анти-A и Анти-AB говорит о наличии агглютиногена A. Групповая принадлежность: A(II).
- Реакция в лунках с Анти-B и Анти-AB указывает на наличие антигена B. Групповая принадлежность: B(III).
- Реакция во всех трех лунках говорит о присутствии обоих антигенов. Группа: AB(IV).
Методика проведения исследования с помощью цоликлонов требует обязательного подтверждения результатов реакции выявлением агглютининов α и β стандартными эритроцитами.
Алгоритм определения резус-фактора представлен в соответствующей статье.
Источник
Определение группы крови
Определение группы крови – процедура, в ходе которой анализируют антигены – белки, входящие в состав эритроцитов, красных кровяных телец. Существует несколько разновидностей антигенов и вырабатываемых ими антител, исходя из чего каждого человека, в зависимости от состава его эритроцитов, можно причислить к определенной группе крови.
Вы можете пройти определение группы крови и резус-фактора в Поликлинике Отрадное. Срок готовности результатов анализа – от одного дня. Если у вас нет времени, чтобы приехать в клинику, сдать кровь для исследования вы можете и на дому: к вам выедет медсестра.
Наличие данных о собственной группе крови в критической ситуации, когда счет идет на минуты, может спасти человеку жизнь. Если такой информации нет, то врачам, перед переливанием крови придется дополнительно тратить время на исследование. Поэтому каждому пациенту рекомендуется сдать анализ на определение группы крови и всегда носить распечатку результатов исследования с собой: например, в кошельке, рядом с другими важными документами.
Определение группы крови и резус-фактора
Сейчас существует более 30 разных подходов к определению групп крови. В зависимости от используемой системы, количество групп крови может быть разным: системы Келл, Кид и Даффи выделяют 3, а MNSs – 9. И все же наиболее распространенными являются две системы:
Система AB0 выделяет 4 группы крови и подразумевает исследование 3 видов антигенов – A, B и H. Однако в результатах анализов H принято заменять на 0 (что говорит об отсутствии в эритроцитах антигенов A и B). Буквы дополняют цифрами – I, II, III или IV. Именно поэтому сами пациенты часто говорят о своей группе крови не в буквенном, а цифровом обозначении – первая, вторая, третья или четвертая. В ходе анализа учитывается не только присутствие/отсутствие в эритроцитах антигенов, но также и наличие в плазме крови агглютининов. Это специфические белки, антитела, атакующие «чужеродные» эритроциты. Если пациенту перелить кровь группы с не подходящими ему антигенами, агглютинины уничтожат содержащие их эритроциты.
По системе AB0 выделяют следующие группы крови:
- 0 (I) – антигены A и B отсутствуют, выявлены антитела α и β.
- А (II) – присутствуют антиген А и антитело β.
- B (III) – в наличии антиген B и антитело α.
- AB (IV) – выявлены антигены A и B, антител нет.
Система Rh (резус-фактор) подразумевает анализ антигена D – специфического белка крови, присутствующего или отсутствующего на поверхности эритроцитов. Резус-фактор будет положительным (обозначается как Rh+) при наличии антигена. При отсутствии этого белка — он отрицателен (Rh-).
Резус-фактор имеет значение лишь в 2 ситуациях:
- При переливании крови. Если в организм пациента попадает кровь с иным резус-фактором, способен возникнуть резус-конфликт. Это может привести к гемотрансфузионному шоку – редкому, но серьезному осложнению, которое выражается в значительном ухудшении самочувствия пациента, снижении артериального давления, затруднении дыхания. Иногда происходит нарушение функций сердца, печени или почек, что может стать причиной летального исхода. Резус-отрицательным людям переливают кровь исключительно с отрицательным резусом. Пациентам с положительным резус-фактором при отсутствии альтернативы можно перелить до 500 мл резус-отрицательной крови.
- При планировании беременности. Если у матери Rh отрицательный, а у отца – положительный, и ребенок унаследовал резус-фактор мужчины, при беременности может развиться резус-конфликт. Организм матери начинает воспринимать плод как «чужеродное тело» и атакует его эритроциты. В итоге ребенок испытывает кислородное голодание, может также произойти самопроизвольный аборт. Врачи способны предотвратить данные последствия и обеспечить нормальное течение беременности и рождение здорового малыша. Но для этого необходимо заранее (желательно еще до зачатия) узнать резус-факторы потенциальных матери и отца. При положительном Rh у матери опасности возникновения резус-конфликта нет, вне зависимости от резус-фактора отца.
Определение группы крови обычно подразумевает применение обеих систем: ABO и Rh.
Показания к исследованию
Анализ на определение группы крови осуществляется:
- По желанию пациента (если он хочет на всякий случай знать свою группу крови).
- Перед плановыми операциями, предполагающими кровопотери.
- Для людей, деятельность которых связана с риском получения тяжелых травм (например, военных, спасателей, пожарных).
- При планировании беременности – во избежание резус-конфликта.
- Ежемесячно во время беременности (после 32 недели чаще), если ранее было выяснено, что у женщины отрицательный Rh, а у мужчины – положительный. При выявлении отклонений от нормы будет назначено лечение.
- Для новорожденного ребенка, если у его матери отрицательный резус-фактор, а у отца положительный, даже если во время беременности не возникало проблем.
При наличии у малыша положительного Rh для профилактики резус-конфликта во время последующей беременности женщине в первые трое суток после родов вводят антирезусный иммуноглобулин.
- Для новорожденного при наличии признаков гемолитической болезни – состояния, обусловленного несовместимостью Rh матери и ребенка. Симптомами патологии являются желтуха, анемия, отеки. Выявляется гемолитическая болезнь еще во внутриутробный период.
Важно! Резус-конфликт редко возникает при первой беременности, обычно – при последующих. Это объясняется тем, что иммунная система женщины сталкивается с «чужеродным» антигеном впервые, и не успевает дать сильный ответ, но «запоминает угрозу». В следующий раз она уже отреагирует гораздо агрессивнее. Однако определение группы крови и резус-фактора необходимо проводить и перед первой беременностью. Введение антирезусного препарата после первых родов позволит избежать осложнений последующих беременностей.
Экстренно определение группы крови требуется перед переливанием крови в следующих случаях:
- при тяжелых анемиях;
- при кровотечениях (маточных, желудочно-кишечных, легочных);
- при внеплановых хирургических вмешательствах;
- при серьезных травмах, связанных с потерей большого количества крови.
Подготовка к исследованию
Специфических подготовительных мер не требуется. Однако принимать пищу рекомендуется не позднее чем за 4 часа до забора крови. Также накануне процедуры следует исключить чрезмерные физические нагрузки. Лучше прийти в клинику заблаговременно и до сдачи крови в течение 10-15 минут спокойно посидеть.
Так как на результаты исследования могут оказывать влияние некоторые заболевания, прием ряда лекарств, особенности питания и даже эмоциональное состояние пациента, анализ рекомендуется во избежание получения недостоверных результатов проводить два раза. Следует заранее предоставить врачу список всех принимаемых медикаментов.
Методы определения группы крови
В настоящее время существуют 3 основных метода определения группы крови, соответствующие системе AB0:
- Определение группы крови стандартными сыворотками.
- Метод перекрестной реакции.
- Определение группы крови цоликлонами.
Кровь для исследования обычно берется из вены, иногда из пальца.
Стандартный метод
Определение группы крови по стандартным сывороткам – наиболее простой и распространенный метод. Используемые сыворотки соответствуют 4 группам крови и окрашены в разные цвета:
- бесцветная – группы 0 (I);
- синяя (голубая) – группы A (II);
- красная (розовая) – группы B (III);
- желтая – группы AB (IV).
Справка. Изогемагглютинирующие сыворотки изготавливают из крови доноров. Они имеют срок годности и должны храниться при температуре 4-8 °С. Сыворотки выпускаются сериями, номер серии отмечают на ампуле. Для анализа берут по две сыворотки каждой группы из разных серий. Это позволяет исключить ошибку в результатах исследования.
Определение группы крови – алгоритм:
- На специальную тарелку или стекло наносят капли сывороток
- Затем в каждую каплю добавляют кровь пациента.
- Тарелку осторожно покачивают, чтобы сыворотки соединились с кровью.
- Через 5 минут наблюдают, произошла ли реакция агглютинации («склеивания» эритроцитов): если да, то в пробе образуются зерна или хлопья.
- При отсутствии реакции агглютинации во всех пробах – группа крови пациента 0 (I).
- Отсутствие реакции агглютинации в пробе с сывороткой II группы, во всех остальных агглютинация произошла – группа A (II).
- Отсутствие агглютинации в капле сыворотки III группы – у пациента группа крови B (III).
- Реакция агглютинации произошла во всех пробах – группа крови AB (IV).
Метод перекрестной реакции
Исследование подразумевает проведение двух анализов: со стандартными сыворотками и со стандартными эритроцитами. Для процедуры с эритроцитами используется сыворотка крови пациента. Ее получают путем центрифугирования биоматериала. Сыворотку подвергают воздействию стандартных эритроцитов.
Справка. Стандартные эритроциты получают из донорской крови групп 0, A и B. Для анализа берется по 2 образца одних и тех же эритроцитов из разных серий.
На тарелку наносят капли сыворотки крови пациента, а рядом с ними – капли стандартных эритроцитов. Тарелку покачивают, чтобы материалы смешались. Затем оценивают результаты:
- Если агглютинация произошла с эритроцитами групп А и B – группа крови пациента 0.
- При наличии агглютинации с эритроцитами группы B – группа крови A.
- Агглютинация с эритроцитами группы А – группа крови B.
- При отсутствии агглютинации во всех пробах – группа крови AB.
Параллельно с этим исследованием проводят анализ стандартным методом, а затем сравнивают результаты.
Определение группы крови цоликлонами
Определение группы крови с помощью цоликлонов проводится точно так же, как по стандартному методу. Результаты оцениваются тем же образом. Разница лишь в том, что вместо стандартных сывороток применяют цоликлоны анти-А и анти-B – это синтетические сыворотки, содержащие искусственные агглютинины α и β.
Определение резус-фактора
Резус-фактор может определяться с помощью:
- антирезусной сыворотки (экспресс-метод);
- цоликлона анти-D супер.
Для исследования с помощью стандартной антирезусной сыворотки могут использовать кровь пациента или эритроциты, полученные из нее. В пробирку капают стандартную антирезусную сыворотку, затем вводят каплю крови пациента или эритроциты. Пробирку вращают в руках, чтобы кровь смешалась с сывороткой. В пробирку также добавляют немного физраствора. Результаты оцениваются по наличию/отсутствию агглютинации:
- Присутствует – резус положительный.
- Отсутствует – резус отрицательный.
Анализ с помощью цоликлона анти-D супер проводится на тарелке. На нее наносят реагент, рядом располагают каплю крови. Тарелку покачивают, чтобы материалы соединились. Затем, как и в предыдущем методе, оценивают наличие или отсутствие реакции агглютинации.
Резус-фактор: отрицательный и положительный
Около 85% всех жителей планеты обладают положительным резус-фактором. Наличие или отсутствие антигена D не сказывается на самочувствии и здоровье пациента.
Правила расшифровки результатов
Результаты анализа выдаются пациенту в следующей форме:
- группа крови (0, А, В, АВ);
- резус-фактор: Rh+ (положительный) или Rh- (отрицательный).
Результаты анализа на определение группы крови будут актуальными на протяжении всей жизни. Если исследование уже было проведено, повторять его заново не требуется. Группа крови – «постоянная величина» и генетически наследуемый признак, то есть не изменяется в течение жизни. Хотя однажды у юной австралийки Деми Ли-Бреннан поменялась группа крови после пересадки печени. Но данный случай является исключением, и доктора так и не смогли однозначно объяснить этот феномен.
Иногда некоторые пациенты утверждают, что вследствие какого-то заболевания или во время беременности у них изменилась группа крови. Это можно объяснить врачебной ошибкой. И беременность, и некоторые патологии способны затруднять расшифровку результатов анализов, вследствие чего они могут получиться недостоверными. Бывают случаи, что ошибка была допущена при предыдущем исследовании крови.
Источник