Приготовление индикаторов
1. Метиловый красный — 0,2%-ный раствор (метилрот; диметиламиноазобензол-о-карбоновая кислота). Реактив представляет собой блестящие темно-фиолетовые кристаллы или красно-бурый порошок. В воде нерастворим; растворим в спирте. Переход окраски от красной к желтой наступает в интервале pH 4,2-6,2.
0,2 г индикатора растворяют в 60 мл спирта и добавляют 40 мл воды.
2. Метиловый оранжевый — 0,1%-ный раствор (метилоранждиметиламиназобензол сульфонат натрия) — оранжево-желтый порошок или листочки. Нерастворим в спирте, легкорастворим в горячей воде.
Переход окраски от красной к желтой в интервале pH 3,0-4,4. 0,1 г индикатора растворяют в 100 мл воды.
3. Фенолфталеин — 1%-ный раствор. Мелкокристаллический порошок белого (или слегка кремового цвета) растворяется в спирте и нерастворим в воде. Переход окраски от бесцветной к красной в интервале pH 8,2-10,0. 1 г индикатора растворяют в 100 мл 96%-ного спирта.
4. Бромфеноловый синий — 0,1%-ный раствор (тетрабромфенолсульфофталеин) — мелкие, почти бесцветные или бледно-розовые кристаллы, плохо растворимые в воде; растворяются в этиловом спирте и в серном эфире. В растворах щелочей и аммиака растворяются с синим окрашиванием.
100 мг индикатора растирают в фарфоровой ступке с 1,5 мл 0,1 н. раствора едкого натра, постепенно прибавляют прокипяченную дистиллированную воду. В мерной колбе раствор доводят прокипяченной дистиллированной водой до 100 мл.
5. 10%-ный раствор хромовокислого калия (K2CrO4). 10 г реактива отвешивают с точностью до 0,01 г и растворяют в 90 мл дистиллированной воды.
6. 1%-ный раствор крахмала. 1 г растворимого крахмала растирают в ступке с небольшим количеством холодной воды, полученную кашицу выливают в 100 мл кипящей дистиллированной воды. Кипятят, пока раствор не станет прозрачным.
Источник
1. ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ
1.1 а. При приготовлении растворов должны быть соблюдены требования ГОСТ 27025-86 .
1.1 . Растворы готовят из индикаторов, тонкорастертых в агатовой или фарфоровой ступке.
1.2 . Массы навесок индикаторов взвешивают с погрешностью не более 0,001 г.
1.3 . При необходимости индикаторы в этиловом спирте растворяют при нагревании на водяной бане.
1.4 . Для приготовления растворов индикаторов, индикаторных бумаг и смесей применяют вспомогательные реактивы квалификации химически чистый, х. ч., или чистый для анализа, ч. д. а., (в соответствии с действующей нормативно-технической документацией на них) или их растворы.
1.4 .а. Для приготовления индикаторных бумаг используют обеззоленные бумажные фильтры или промытую и высушенную фильтровальную бумагу.
Фильтровальную бумагу предварительно промывают разбавленным раствором соляной кислоты, потом водой, затем разбавленным раствором аммиака, опять водой, и высушивают.
1.5 . Для увеличения срока хранения водных растворов индикаторов при приготовлении этих растворов допускается добавлять до 20 % этилового спирта при сохранении общего объема приготовленного раствора.
1.4 — 1.5 . (Измененная редакция, Изм. № 1).
1.6 . Интервал рН перехода окраски растворов кислотно-основных индикаторов определяют по буферным смесям, приготовленным по ГОСТ 4919.2-77 .
При этом в шесть хорошо вымытых пропаренных сухих пробирок из бесцветного стекла одинакового диаметра наливают по 5 мл следующих буферных смесей: в две пробирки буферные смеси, соответствующие величинам рН, указанным в табл. 1, в четыре остальные — смеси, имеющие на 0,2 и 0,4 рН ниже первой величины и на 0,2 и 0,4 рН выше второй величины.
В каждую пробирку прибавляют по 0,05 мл раствора индикатора, содержимое пробирок перемешивают и наблюдают окраску растворов на фоне молочного стекла в проходящем свете.
Из шести пробирок шкалы, расположенных в порядке возрастания значений рН, в двух первых пробирках окраски должны быть одинаковыми и соответствовать окраске более кислой среды, указанной в табл. 1.
В двух последних пробирках окраски должны быть одинаковыми и соответствовать окраске более щелочной среды, указанной в табл. 1; в двух средних пробирках должно наблюдаться первое изменение окрасок в сторону того или другого цвета.
Пример. Определение интервала рН перехода окраски фенолового красного.
Интервал рН перехода окраски 6,8 — 8,4.
Переход окраски от желтой к красной.
Готовят шкалу буферных смесей со следующими значениями рН: 6.4; 6,6; 6,8; 8,4; 8,6; 8.8.
Буферные смеси при рН 6,4 и 6,6 должны быть одинаково окрашены в желтый цвет; в буферной смеси при рН 6,8 должно наблюдаться первое изменение окраски в красный цвет; в буферной смеси при рН 8,4 должно наблюдаться первое изменение красной окраски в желтую; буферные смеси при рН 8,6 и 8,8 должны быть одинаково окрашены в красный цвет.
1.7 . Пригодность приготовленных растворов других групп индикаторов проверяют по нормативно-технической документации на эти индикаторы.
(Измененная редакция, Изм. № 1).
1.8 . Растворы индикаторов и индикаторные смеси хранят в местах, защищенных от света.
1.9 . Растворы смешанных индикаторов хранят в склянках, изготовленных из темного стекла.
1.10 . При длительном хранении растворов индикаторов и индикаторных смесей перед их применением следует убедиться в том, что внешний вид их не изменился.
1.8 — 1.10 . (Введены дополнительно, Изм. № 1).
2. РЕАКТИВЫ И РАСТВОРЫ
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.
Железо сернокислое закисное по ГОСТ 4148-78.
Калий азотнокислый по ГОСТ 4217-77.
Калий хлористый по ГОСТ 4234-77.
Калий йодистый по ГОСТ 4232-74.
Калий йодноватокислый по ГОСТ 4202-75.
Кислота азотная по ГОСТ 4461-77.
Кислота серная по ГОСТ 4204-77.
Кислота соляная по ГОСТ 3118-77, 0,02 н. раствор (для растворов индикаторов) и 0,1 н. раствор (для индикаторных бумаг).
Кислота уксусная по ГОСТ 61-75, 99 — 100 %-ная, 30 %-ный и 50 %-ный растворы.
Крахмал растворимый по ГОСТ 10163-76.
Медь сернокислая по ГОСТ 4165-78, 1 н. раствор.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328-77, 0,02 н. раствор (для растворов индикаторов) и 0,1 н. раствор (для индикаторных бумаг).
Натрий тетраборнокислый (бура) по ГОСТ 4199-76, 0,05 М раствор.
Натрий углекислый безводный по ГОСТ 83-79, 0,2 %-ный раствор.
Натрий хлористый по ГОСТ 4233-77.
Спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300-87, высшего сорта.
Свинец уксуснокислый по ГОСТ 1027-67.
Спирт метиловый по ГОСТ 6995-77.
Углерод четыреххлористый по ГОСТ 20288-74.
Разд. 2. (Измененная редакция, Изм. № 1).
Источник
Оценка предстерилизационной очистки с помощью фенолфталеина
Обработка медицинского инструментария в лечебных учреждениях является одним из методов, предотвращающих распространение внутрибольничных инфекций и риск заражения опасными инфекциями пациентов и работников. Одноразовый инструментарий перед утилизацией достаточно подвергнуть дезинфекции химическим или физическим методом в зависимости от режима учреждения. Многоразовый инструментарий, то есть тот, который используется неоднократно – хирургические, стоматологические, гинекологические инструменты, нуждается в проведении нескольких этапов обработки. Первый этап — это дезинфекция, проводится он с использованием различных растворов или при помощи кипячения. Второй этап – предстерилизационная очистка, после него проводится стерилизация в автоклавах или сухожаровых шкафах.
Целью предстерилизационной очистки является удаление жировых и белковых компонентов, образующихся в результате попадания биологических жидкостей пациента и дезинфицирующих растворов. Предстерилизационная обработка проводится в моющем растворе, с соблюдением способов промывки труднодоступных мест, инструментария и времени выдержки. После чего инструменты промываются в проточной и дистиллированной воде. Оценить качество предстерилизационного этапа можно с проведением проб на скрытую кровь и на остатки моющего средства. 
Приготовление раствора фенолфталеина и его использование позволит выявить остатки активных веществ моющего раствора. Раствор фенолфталеина наносится на инструментарий после того, как его промыли в дистиллированной воде. О наличии остатков моющих средств говорит получившееся в результате пробы розовое окрашивание реактива.
Приготовление фенолфталеина обычно происходит в аптечных условиях, но существует методика, позволяющая изготовить пробу, используя заводские компоненты. Для этого потребуется сухой мелкокристаллический порошок фенолфталеина, мерная посуда, 95% этиловый спирт. Отмеряют один грамм порошка и добавляют спирта до 100 миллилитров. Флакон с получившейся жидкостью хранят в холодильнике один месяц. При необходимости проведения проб флакон достают и с помощью пипетки наносят реактив на места конструктивных закреплений инструментария, в полости и отверстия. Инструмент держат над чистой ватой или марлевым тампоном, цвет упавших с него капель жидкости оценивают в периоде до 2-х минут. При наличии розового окрашивания проводят промывку всей партии мединструментария, включая взятый для контроля, под проточной и дистиллированной водой.
Гост фенолфталеин требует при приготовлении растворов использовать только химически чистые вещества без посторонних компонентов и для растворения брать стеклянную или фарфоровую посуду. Это необходимо для того чтобы исключить возможность вступления реактива в реакцию с металлами или искусственными материалами.
Как приготовить раствор фенолфталеина необходимо знать каждому медработнику, основной обязанностью которого является дезинфекция и стерилизация инструмента. Пренебрежение проведением фенолфталеиновой пробы грозит появлением осложнений у пациентов в виде пирогенных и аллергических реакций.
Источник
Методические указания по приготовлению индикаторов
Индикаторы, применяемые при объемных определениях и при колориметрическом определении pH
4-Нитро-4-оксиазобензол-3-карбоксилат натрия C 13 H 8 N 3 NaO 5 М.в.309,22 Желтовато или красновато-коричневый кристаллический порошок или мелкие блестящие кристаллы кирпично-красного цвета. Мало растворим в воде и спирте. Переход окраски от желтой к лиловой в пределах ( pH 10,1-12,1). Раствор индикатора .0,1г растертого индикатора растворяют в воде при нагревании на водяной бане и по охлаждении доводят водой до 100 мл.
Бромкрезоловый зеленый (синий) Тетрабром –м-крезолсульфофталеин C 21 Н 14 Br 4 O 5 S М.в.698,0 Слегка буроватый кристаллический порошок. Мало растворим в воде, лучше – в спирте, растворим в разбавленных растворах щелочей. Переход окраски от желтой через зеленую к синей в пределах ( pH 3,8-5,4). Раствор индикатора .0,1г индикатора растирают в ступке с 2,9мл 0,05н. раствора едкого натра и после его растворения доводят свежепрокипяченной и охлажденной водой до 200мл.
Бромтимоловый синий Дибромтимолсульфофталеи C 27 H 28 Br 2 O 5 S М.в.624,4 Белый мелкокристаллический порошок. Очень мало растворим в воде, легко — в спирте, эфире, растворах едких и углекислых щелочей и растворе аммиака. Переход окраски от желтой через зеленую к синей в пределах ( pH 6,0-7,6). Растворы индикатора .1. 0,1г растертого индикатора растворяют в 20мл теплого спирта и после охлаждения доводят водой до 100мл. 2. 0,1г индикатора растирают в ступке с 3,2мл 0,05н. раствора едкого натра и после его растворения доводят свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250мл.
Бромфеноловый синий Тетрабромфенолсульфофталеин C 19 H 10 Br 4 O 5 S М.в.670,0 Мелкокристаллический порошок розовато- желтого цвета. Трудно растворим в воде, легко- в спирте и растворах щелочей. Переход окраски от желтой через зеленую к фиолетово-синей в пределах ( pH 3,0-4,6). Растворы индикатора .1.0,1г растертого индикатора растворяют в 20мл теплого спирта и после охлаждения доводят водой до 100мл. 2.0,1г индикатора растирают в ступке с 3,0мл 0,05н. раствора едкого натра и после его растворения доводят свежекипяченой и охлажденной водой до 250мл.
Дифенилкарбазон C 13 H 12 N 4 O М.в.240,27 Желтоватый или желтовато- красноватый кристаллический порошок. Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте, хлороформе и бензоле. Температура плавления 157 с разложением. Применяется как адсорбционный индикатор в меркурометрии при определении галоидов и цианидов. Раствор индикатора . 1г растертого индикатора растворяют в 95% спирте и доводят тем же спиртом до 500мл. На 10мл титруемой жидкости берут 8-10 капель раствора индикатора.
Бледно- фиолетовые кристаллы вяжущего вкуса, выветривающиеся на воздухе. Растворимы в 3ч. воды, практически нерастворимы в спирте. Водный раствор имеет кислую реакцию. С растворами роданидов дают темно- красное окрашивание.
Раствор индикатора. 30г железоаммониевых квасцов растворяют в 100мл воды; к раствору прибавляют разведенной азотной кислоты до перехода коричневой окраски в желтовато- зеленую. На 100мл титруемой жидкости берут 1-2мл раствора индикатора. Раствор сохраняют в защищенном от света месте.
Кислотный хром темно- синий
1,8-Диокси -2-2оксифенилазо-нафталин-3,6-дисульфонат натрия C 16 H 10 N 2 Na 2 O 9 S 2 М.в.484,4 Однородный порошок темно- коричневого цвета. В щелочной среде ( pH 9,5-10,0) имеет сине- фиолетовую окраску; его комплексы с кальцием, магнием и цинком в тех же условиях красного цвета. Переход окраски при прямом титровании от красной к сине- фиолетовой. Индикаторная смесь . 0,25г индикатора и 25г хлорида натрия х. ч. растирают в ступке и перемешивают. Раствор индикатора . 0,5г индикатора растворят в 10мл аммиачного буферного раствора ( pH 9,5-10,0) и доводят до 100мл спиртом. На 50мл титруемой жидкости берут около 0,1г индикаторной смеси или 6- 7капель раствора индикатора.
Кислотный хром черный специальный
Хромоген черный специальный ЕТ-00, эриохром черный Т 1-(1-Оксинафтилазо-2)-2-окси-5-нитронафталин-4-сульфонат натрия C 20 H 12 N 3 Na O 7 S М.в.461,4 Однородный порошок темно-коричневого цвета. Мало растворим в воде. В щелочной среде ( pH 9,5-10,0) имеет синюю окраску, а его комплексы с кальцием, магнием и цинком в тех же условиях фиолетово- красного цвета. Переход окраски при прямом титровании от фиолетово- красной к синей. Индикаторная смесь . 0,25г индикатора и 25г хлорида натрия х. ч. растирают в ступке и перемешивают. Раствор индикатора . 0,5г индикатора и 4,5г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 100мл метилового спирта. Раствор нестойкий. На 50мл титруемой жидкости берут около 0,1г индикаторной смеси или 5- 7капель раствора индикатора.
Конго красный Дифенил-4,4-бис-(2-азо-1-аминонафталин-4-сульфонат натрия) C 32 H 22 N 6 Na 2 O 6 S 2 М.в.696,7 Темно- красный порошок. Трудно растворим в холодной воде, щелочах и спирте, легко растворим в горячей воде, практически не растворим в большинстве органических растворителей. Переход окраски от сине- фиолетовой к красной в пределах pH 3,0-5,2. Раствор индикатора . 0,1г индикатора растворяют в 20мл спирте и доводят водой до 100мл. Бумага конго . Белую фильтровальную бумагу пропитывают раствором индикатора и сушат на воздухе в темном помещении, не содержащем паров кислот и аммиака.
Белый матовый, тонкий порошок без запаха и вкуса. 5мл 1% раствора, приготовленного, как указано ниже, разбавленные 100мл воды, должны давать с 2каплями 0,1н. раствора йода чисто синюю окраску. Раствор индикатора . 1г крахмал растирают в ступке с 5мл воды до получения однородной кашицы, и смесь медленно вливают при постоянном размешивании в 100мл кипящей воды. Кипятят в течение 2-3минут до получения слегка опалесцирующей жидкости. Раствором можно пользоваться не более 2-3дней. На 100мл титруемой жидкости берут 1-2мл раствора индикатора.
Примечание. При изготовлении раствора из картофельного крахмала клейстер, полученный указанным выше образом, дополнительно нагревают в автоклаве в течение 1 часа при 120 0. Раствор крахмала с йодидом калия. Растворяют 0,5г йодида калия в 100мл свежеприготовленного раствора крахмала. Раствор пригоден только в течение 24 часов. Йодкрахмальная бумага. Пористую безсольную фильтровальную бумагу пропитывают раствором крахмала с йодидом калия и сушат в темном помещении на воздухе не содержащим паров кислот. Бумагу разрезают на полоски длиной около 50мм и шириной около 6мм. Полоска йодкрахмальной бумаги не должна тотчас синеть при смачивании ее 1 каплей 0,1 н.раствора соляной кислоты. Йодкрахмальную бумагу хранят в банках оранжевого стекла с притертой пробкой в темном месте.
Кристаллический фиолетовый Гексаметил — n — розанилиний — хлорид C 25 H 30 CI N 3 М.в.408.0 Бронзовые блестящие кристаллы или кристаллический порошок темно-зеленого цвета. Растворим в воде, спирте и безводной уксусной кислоте. Переход окраски при неводном титровании от фиолетовой (щелочная) через сине-зеленую (нейтральная) к желтовато-зеленой (кислая). Раствор индикатора в безводной уксусной кислоте.0,1г индикатора растворяют в безводной уксусной кислоте и доводят той же кислотой до 100мл.
C 15 H 15 N 3 O 2 М.в.269.29 Блестящие красно-фиолетовые кристаллы или красно-бурый кристаллический порошок. Мало растворим в воде, трудно растворим в спирте, легко в кипящем спирте растворим в растворах едких и углекислых щелочей. Переход окраски от красной к желтой в пределах pH 4,2-6,3. Растворы индикатора.1.0,1г растертого индикатора растворяют в 60мл спирта и доводят спиртом до 100мл. 2.0,1г индикатора растирают в ступке с 7,4мл 0,05 н. раствора редкого натра и после его растворения доводят свежее прокипяченной и охлажденной водой до 250мл.
4-Диметиламиноазобензол-4-сульфонат натрия C 14 H 14 N 3 Na O 3 S М.в.327,34 Кристаллический порошок оранжевого иногда с коричневатым оттенком цвета. Трудно растворим в воде, легче растворим в горячей воде практически не растворим в спирте. Переход окраски от красной через оранжевую к желтой в пределах pH 3,0-4,4. Раствор индикатора.0,1г растертого индикатора растворяют в воде и доводят водой до 100мл. Насыщенный раствор индикатора в ацетоне. К 0,025г индикатора прибавляют 100мл ацетона и время от времени встряхивают через 1 час фильтруют.
4- (Фениламино) — азобензол-4-сульфонат калия
Коричневато-желтый с золотистым оттенком кристаллический порошок. Растворим в воде и спирте. Переход окраски от красной к желтой в пределах pH 1,3-3,2. Раствор индикатора. 0,1г растертого индикатора растворяют в воде при нагревании на водяной бане, и после охлаждения доводят водой до 100мл. Раствор индикатора в метиловом спирте. К 0,2г индикатора прибавляют 100мл метилового спирта и время от времени взбалтывают (около 1 часа) после чего фильтруют.
См. статью « Phenolphthaleinum » Переход окраски от бесцветной к красной в пределах pH 8,2- 10,0. Раствор индикатор . 1г индикатора растворяют в спирте и доводят спиртом до 100мл.
K 2 Cr O 4 М.в.194,20 Желтые кристаллы. Легко растворим в воде, практически не растворим в спирте. С раствором нитрата серебра в нейтральной среде дает красный осадок. Раствор индикатора . 5г хромата калия растворяют в воде и доводят водой до 100мл. На 100мл титруемой жидкости берут 1-2мл раствора индикатора.
Источник