Как правильно приготовить препарат для микроскопа

Благодаря микроскопу человек открыл для себя удивительный мир, о существовании которого ранее и не мог подумать. Ежедневно по всему миру в лабораториях и медицинских центрах, учебных заведениях и на производственных предприятиях к окуляру светового или монитору цифрового микроскопа обращаются сотни тысяч внимательных пар глаз, пытаясь постичь доселе неведомое или еще раз убедиться, что процесс идет в верном направлении. Однако, материалы для исследований бывают разные, в том числе живые, и чтобы можно было с ними работать, следует правильно готовить микропрепараты, которые позволят всесторонне и качественно изучить предмет исследования. Все образцы для микроскопа, жизнь которых протекает на клеточном уровне, можно условно разделить на две основные категории, о которых мы поговорим ниже, также упомянув такой способ приготовления микропрепаратов, как окрашивание.

Приготовление влажного препарата для исследования

В приготовлении влажных препаратов для исследования под микроскопом возникает необходимость, если образец без воды живет непродолжительное время, как это бывает с некоторыми одноклеточными организмами. Для приготовления микропрепарата следует в центр чистого предметного стекла с помощью пипетки поместить одну-две капли дистиллированной воды. После размещения в воде исследуемого образца, его необходимо накрыть сверху покровным стеклом и немного прижать. Производить приготовление микропрепарата можно только в резиновых перчатках. В противном случае, жировые пятная от пальцев рук на стеклах будут мешать наблюдению образца под микроскопом.

Приготовление сухого препарата для исследования

Сухой препарат — это объект исследования, который не нуждается в воде для выживания. Приготовление сухого микропрепарата намного проще, чем влажного. Достаточно поместить как можно тонкий срез препарата в центр предметного стекла и накрыть его сверху покровным стеклом. Если на руках резиновые перчатки, образец для исследования под микроскопом можно немного прижать верхним стеклом.

Подкрашивание препарата для исследования

Встречаются микроорганизмы, исследование которых под микроскопом без предварительного окрашивания невозможно. Самым надежными сегодня способом окрашивания является использование йодида калия или раствор йода — так называемые, растворы Люголя. Для приготовления микропрепарата следует поместить его в воду на предметном стекле, в которую необходимо добавить каплю контрастного вещества. Кроме раствора Люголя можно использовать растворы «кристаллического фиолетового» или «метиленового синего». Иногда бывает, что необходимо окрасить уже готовый микропрепарат. В этом случае следует разместить с одной стороны покровного стекла бумажную салфетку, а с другой — краситель. Салфетка вытянет влагу с одной стороны стекла и затянет под него краситель с другой, окрашивая тем самым исследуемый препарат.

Источник

Как правильно приготовить препарат для микроскопа

Вы приобрели микроскоп с мощным увеличением, что делать дальше?!
Возникает вопрос, что же можно в него увидеть, и где это взять?!
Есть два хороших варианта.

Первый, более простой, но не менее интересный, приобрести сразу набор готовых микропрепаратов.
http://vk.com/album-60198342_181686705
Но, даже после этого, спустя какое-то время, захочется изготовить что-то самим. И вот тут как раз появляется альтернатива.

Второй вариант, про что и пойдет речь в данной статье. Как приготовить самим микропрепарат.
Для начала, потребуется наличие набора чистых предметных и покровных стекол, которые так же можно приобрести. http://vk.com/photo-60198342_313580474
Итак, как же приготовить микропрепарат в домашних условиях?
В первую очередь, нужно разобраться, какие они бывают.
А бывают они временные и постоянные.
Для приготовления временного препарата, необходимо на предметное стекло поместить сначала каплю воды (глицерина, раствора, красителя, реактива), а потом в эту каплю поместить уже сам микрообъект. После этого капля накрывается покровным стеклом. Полученный микропрепарат готов к использованию. Такой временный препарат можно использовать повторно в течение нескольких последующих дней при правильном хранении.

Постоянные микропрепараты в отличие от временных могут храниться годами, для этого микрообъекты помещаются в специальный бальзам (целлоидин).
Микропрепараты можно разделить на сухие и влажные. Выше была описана методика приготовления влажного препарата, то есть препарата, в котором образец не может обходиться без воды, чтобы оставаться живым. Что касается сухих микропрепаратов, то для их приготовления не используется вода. На предметное стекло помещается очень тонкий срез образца, который накрывается покровным стеклом. После этого покровное стекло можно слегка придавить (только делайте это в резиновых перчатках, чтобы не оставлять следов).
Иногда при приготовлении микропрепаратов дополнительно используют специальный краситель, так как без окрашивания некоторые образцы очень трудно изучать под микроскопом. Обычно в качестве красителя используется раствор йода и йодида калия (также в ход может идти раствор «метиленового синего» или «кристаллического фиолетового»).
Рассмотрим пару примеров!

1. Возьмите предметное стекло и, держа его за боковые грани, положите на стол.
Положите в центр стекла объект исследования (тонкие волокна ваты).
В пипетку наберите немного воды из стаканчика и нанесите на препарат 1-2 капли.
Возьмите за боковые грани покровное стекло и положите его сверху на предметное стекло (см.рис.ниже).
Препарат готов. Положите его на предметный столик и рассмотрите под микроскопом.

2.Приготовление препарата чешуи кожицы лука. Данный пример, следуя инструкции из первого, попробуйте приготовить сами. При этом, обратите внимание на картинку. (см.рис.ниже).

Таким образом, мы можем рассматривать под микроскопом как готовые микропрепараты из набора, так и микропрепараты приготовленные вручную.

Источник

Техника приготовления микропрепаратов

Микроскопы открывают крохотные миры.
С помощью микроскопа можно увидеть невероятный мир, существующий на клеточном уровне. Поразительным свойством микропрепаратов является возможность их длительного хранения и наблюдения распада клеток с течением времени. В любом случае, если не терпится поскорее взглянуть на образец или проводится долгое научное исследование, нужно научиться приготавливать микропрепараты.

Приготовление сухого препарата

Сухие препараты используются для изучения образцов, не требующих для выживания контакта с водой. Для начала потребуется чистое предметное стекло. Осторожно поместите как можно более тонкий срез образца в центр предметного стекла и накройте его покровным стеклом. Если вы в резиновых перчатках, можете слегка придавить покровное стекло, чтобы выровнять препарат.

Приготовление влажного препарата

Влажные препараты используются, если образец не может обходиться без воды, чтобы оставаться живым. Это часто бывает с одноклеточными организмами и мелкими животными. Возьмите чистое предметное стекло. С помощью пипетки, поместите одну-две капли дистиллированной воды в центр стекла. Поместите в воду образец и накройте его покровным стеклом. Опять же, можно немного прижать покровное стекло, если на руках резиновые перчатки. Прикосновение к стеклу без перчаток оставит на нем отпечатки, мешающие наблюдениям препарата под микроскопом.

Влажные препараты сами по себе удерживают покровное стекло на месте и могут храниться некоторое время. Если исследуемые микроорганизмы слишком подвижны, чтобы их можно было изучать, «замедлить» их, добавив в воду связующий компонент, например «Protoslo» (1,5% раствор метилцеллюлозы).

Подкрашивание препаратов

Некоторые организмы трудно увидеть под микроскопом без дополнительного окрашивания. Лучший способ это сделать – добавить капельку раствора Люголя (раствор йода и йодида калия) в воду перед тем, как поместить в нее образец. Также можно использовать растворы «метиленового синего» или «кристаллического фиолетового».

Если требуется окрасить уже готовый препарат, можно попробовать такую хитрость. Поместите с одной стороны покровного стекла краситель, а с другой – бумажную салфетку. Салфетка будет вытягивать влагу из-под стекла с одной стороны и таким образом затягивать под него краситель с другой стороны.

Источник

Приготовление препарата для микроскопа

В этой статье расскажу 3 способа приготовления препаратов для микроскопа. Эти способы — самые простые.

В начале статьи — так называемый словарик, а точнее пояснения, что такое тот или иной предмет.

Для изготовления микропрепаратов требуется специальный инструмент, красители, а также определенная аккуратность и сноровка. Очень важно строгое соблюдение всех необходимых условий – иначе микропрепарат может оказаться непригодным для исследований.

В продаже есть готовые наборы препаратов для исследований (что удобно для дома и школы) — например, 25 препаратов, или 38 слайдов от Левенгук. А также минералы и другие наборы.

Смотрите КАТАЛОГ микроскопов.

пояснения

Фиксированный препарат — в микробиологии часто готовят именно фиксированные препараты, так что следует знать, что это такое. Эти препараты рассматривают под микроскопом именно в окрашенном виде. Под словом «фиксация» имеется ввиду такая обработка живого объекта (который вы собираетесь рассмотреть), которая дает возможность быстро прервать жизненные процессы в том или ином объекте (поясню проще — убить), при этом сохранив тонкую структуру. В результате фиксации клетки прочно прикрепляются к стеклу и лучше прокрашиваются. Фиксация необходима в случае работы с патогенными микроорганизмами (в целях самобезопасности).

Патоген, патогенный микроорганизм — живой организм, паразит, вызывающей патологическое состояние (заболевания) иного живого организма.

Суспензия — смесь каких-либо веществ, где твёрдое вещество распределено в виде мельчайших частиц в жидком веществе в неосевшем состоянии.

Биологическая петля — тонкая металлическая палочка, на конце — тонкая металлическая петля. Используется для захватывания маленького количества той или иной суспензии микроорганизмов.

Вазелин — мазеобразная жидкость без запаха и вкуса. Смесь состоит из минерального масла и твёрдых парафинов (воскоподобная смесь).

Герметизация — обеспечение совершенной непроницаемости для разных газов и жидкостей поверхностей и мест соединения деталей.

Агар-агар — в микробиологии используется для изготовления плотных и полужидких питательных сред, то есть агаризованных сред.

Жидкость Карнуа — жидкость для фиксации.

Горелка — устройство, имеющее инжектор, который установлен в металлической трубке с отверстиями для поступления в эту трубку атмосферного воздуха, которая закреплена на подставке с боковым вводом для подачи в трубку газа, при этом отверстия выполнены на боковой поверхности трубки, на которой для изменения подачи воздуха в горелку, может быть установлена подвижная заслонка, изменяющая площадь проходного сечения этих отверстий.

Смесь Никифорова — смесь равных объемов этилового спирта и безводного серного эфира, применяется для фиксации мазков крови, мазков-отпечатков органов и каких либо тканей.

Приготовления препарата «раздавленная капля»

Убедитесь, что ваше предметное стекло обезжиренное и чистое.

Нанесите 1-2 капли воды на предметное стекло.

Аккуратно положите объект изучения.

Аккуратно накройте каплю с объектом изучения покровным стеклом. Если вода при накрывании капли покровным стеклом вышла за его пределы, аккуратно удалите её фильтрованной бумагой.

Препарат «раздавленная капля» готов! Приступайте к его изучению.

Приготовление препарата «висячая капля»

Одну каплю суспензии микроорганизмов (заранее приготовленной) с помощью биологической петли аккуратно нанесите на чистое покровное стекло.
Переверните покровное стекло с каплей суспензии так, чтобы капля свободно висела.
Поместите перевёрнутое покровное стекло с каплей над лункой специального покровного стекла с углублением в центре.
Капля не должна касаться краёв стекла и углубления (лунки), она должна свободно висеть на покровном стекле.
Края углубления специального покровного стекла предварительно смазывают вазелином для герметизации камеры.
Наслаждайтесь наблюдением за бактериями в микропрепарате!

Приготовление препарата «отпечаток»

Из агаризованной среды, на которой какие-либо микроорганизмы растут абсолютным сплошным газоном или же в виде отдельных колоний, аккуратно вырежете скальпелем не очень большой кубик.

Перенесите его на предметное стекло таким образом, чтобы поверхность кубика с микроорганизмами была обращена именно вверх.

Затем к газону микроорганизмов или к колонии приложите обычное покровное стекло (абсолютно чистое), аккуратно и не сильно, а слегка, надавите на него биологической петлей или пинцетом и тотчас снимите, стараясь не сдвинуть его в сторону.

Полученный препарат (покровное стекло с отпечатком) помещают именно отпечатком вниз в каплю обычной воды на чистое предметное стекло. Отпечаток также можно получить и на предметном стекле, если касаться поверхности колонии предметным стеклом.

Препарат готов!

Внимание! Препараты живых клеток рассматривают с помощью «сухих систем» микроскопа. После микроскопирования такие препараты перед мытьем должны быть выдержаны в дезрастворе (дезинфицирующее средство).

Приготовление препарата «отпечаток», иной способ

Из агара в чашке Петри с засеянными на нем бактериями (бактериальным газоном) вырежьте блок.

Возьмите обезжиренное чистое стекло и приложите его к поверхности блока агара, засеянного бактериями. Получился первый отпечаток, Отпечатки делайте до тех пор, пока бактериальный слой на блоке не истощится, располагая их слева направо начиная с левой короткой грани стекла.

Дайте отпечаткам подсохнуть и поместите стекло в жидкость Карнуа для фиксации клеток.

Готово!

Приготовление препарата «фиксированный мазок»

Для того, чтобы приготовить этот препарат, требуется на обезжиренное предметное стекло нанести одну каплю воды.

В неё биологической петлей внесите исследуемый вами материал и распределите его так, чтобы получить тонкий и равномерный мазок диаметром примерно 1-1,5 сантиметра (только при таком распределении материала в мазке можно увидеть изолированные бактериальные клетки).

Если исследуемый материал содержится в жидкой среде, то петлей его непосредственно наносят на предметное стекло и готовят мазок. Мазки высушивают на воздухе или в струе теплого воздуха над пламенем горелки.

Для фиксации мазка предметное стекло (именно мазком вверх) очень аккуратно и медленно проводят 3 раза (в течение всего 3 секунд) через пламя горелки. Микроорганизмы, находящиеся в мазке, при фиксации погибают, плотно прикрепляясь к поверхности предметного стекла, и они не смываются при дальнейшей обработке препарата.

Внимание! Более долгое нагревание может вызвать деформацию структур клеток. Мазки крови, мазки-отпечатки органов и каких-либо тканей и (в некоторых случаях и мазки из культур), фиксируют погружением на 5-20 минут в метиловый синий или этиловый спирт, смесь Никифорова, также сулемовый спирт или иные фиксирующие жидкости.

Примеры микропрепаратов для микроскопа

Перечень микропрепаратов набора на 25 слайдов от WSBD World:

Loose Connective Tissue Рыхлая волокнистая соединительная ткань
Spinal Cord c.s. Поперечный срез спинного мозга
Motor Nerve Ending Нервные клеточные окончания (нейроны)
Stomach Mammal Sec. Срез ткани желудка млекопитающего
Kidney c.s. Поперечный срез почки
Artery & Vein c.s. Поперечный срез вены и артерии
Blood Vessel of Lung Срез кровеносного сосуда легкого
Blood Vessel of kidney Срез кровеносного сосуда почки
Tase Bud Вкусовой рецептор
Mouth Smear Мазок со слизистой полости рта
Human Sperm Smear Мазок человеческой спермы
Mitosis of Animal Cell Митоз клетки животного
Hydra thru Testis c.s. Семенник гидры
Hydra thru Ovary c.s. Яичник гидры
Hydra with Bud Гидра с отростком
Fern Prothalium wm Заросток папоротника
Zea Mays Seed l.s. Срез семян кукурузы
Spirogyra Спирогира
Lung Mammal Легкое млекопитающего
Colon Mammal Толстая кишка млекопитающего
Trachea Mammal Трахея млекопитающего
Pancreas Mammal Поджелудочная железа млекопитающего
Uterus Mammal Матка млекопитающего
Spleen Mammal Селезенка млекопитающего
Onion Root Tips Корневые кончики лука

Содержимое другого набора (38 штук) — Levenhuk N38 NG набор готовых микропрепаратов:

Ботаника и зоология:

Кожица лука
Зерновка ржи
Корневой чехлик
Ветка липы
Пыльник
Завязь
Камелия
Эпидермис листа герани
Конечность пчелы
Крыло пчелы
Циклоп
Вольвокс
Эвглена
Инфузория-туфелька
Дождевой червь (поперечный срез)
Ротовой аппарат комара
Аскарида
Дафнии

Биология и физиология:

Мутация дрозофилы (бескрылая форма)
Мутация дрозофилы (черное тело)
Дрозофила «норма»
Животная клетка
Растительная клетка
Плесень мукор
Дробление яйцеклетки
Митоз в корешке лука
Поперечно-полосатые мышцы
Сперматазоиды млекопитающего
Нерв (поперечный срез)
Рыхлая соединительная ткань
Яйцеклетка млекопитающего
Нервные клетки
Гиалиновый хрящ
Гладкие мышцы
Костная ткань
Кровь лягушки
Кровь человека
Однослойный эпителий

Источник