Как приготовить бензидиновую пробу

Собирать кал для исследования следует утром. Доставить кал в лабораторию в течение 1 часа после сбора. Если это затруднительно, можно подготовить пробу заранее, но не более чем за 8 часов перед сдачей кала в лабораторию. В этом случае хранить пробу следует в холодильнике (не замораживать) (для стационарных пациентов – холодильник для проб кабинет В201).
Предварительно помочиться.
Перед процедурой забора кала следует провести тщательный туалет наружных половых органов и области заднего прохода.
Собрать кал в специальный контейнер — чистую, сухую стеклянную или пластиковую посуду с крышкой (лучше использовать специальные одноразовые пластиковые контейнеры с завинчивающимися крышками и наличием ложки-шпателя в крышке контейнера). Общее количество собранного материала должно быть 15-20 грамм (примерный объем чайной ложки); кал для исследования собирается только после самопроизвольной дефекации.
Использование спичечного коробка, как емкости для кала, категорически запрещено.
За 3 суток до сдачи анализа необходимо соблюдать специальную диету. Из ежедневного рациона выводятся все продукты, содержащие в значительном количестве барий, бром, йод и железо, аскорбиновую кислоту, это:
Также из меню следует убрать волокнистые и твердые продукты, которые могут повредить слизистую ротовой полости и желудка:
За 3-е суток до сбора кала не принимать антибиотики; препараты, влияющие на пищеварение; отказаться от приема лекарственных средств, влияющих на перистальтику кишечника (пилокарпин и т.д.), и нестероидных противовоспалительных препаратов (аспирин, ибупрофен, ортофен, диклофенак и др.), слабительные препараты, ректальные свечи, а также проводить очищение кишечника с помощью клизмы.
За 3 дня – сменить зубную щетку на другую (с более мягкой щетиной), чтобы не повредить слизистую полости рта и не спровоцировать кровотечение из десен.
Не рекомендуется проводить исследование кала у женщин во время менструации.

Источник

Анализ кала на скрытую кровь

Анализ кала на скрытую кровь – анализ кала, проводимый в целях выявления скрытого кровотечения из различных отделов желудочно-кишечного тракта. Он позволяет обнаружить измененный гемоглобин эритроцитов даже в том случае, когда сами эритроциты при микроскопическом исследовании кала не определяются.

Исследование кала на скрытую кровь.

Синонимы английские

Occult blood test, fecal occult blood test.

Проба Грегерсена (бензидиновая проба).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона мясо, рыбу, зеленые овощи, томаты в течение 72 часов до исследования.
Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.) и на окраску кала (железа, висмута, сернокислого бария), в течение 72 часов до сбора кала.
Исследование проводить до выполнения ректороманоскопии и других диагностических манипуляций в области кишечника и желудка.

Общая информация об исследовании

Анализ кала на скрытую кровь является крайне важным лабораторным исследованием при диагностике именно скрытых кровотечений из различных отделов ЖКТ. Такие кровотечения – один из ранних симптомов целого ряда тяжелых заболеваний ЖКТ, в том числе онкологических. При скрытом кровотечении, даже длительно существующем, определить наличие крови в кале как визуально, так и микроскопически очень трудно, а чаще всего просто невозможно.

При обильных кровотечениях из различных отделов ЖКТ кровь настолько изменяет внешний вид кала, что ее наличие часто можно определить визуально. Если кровотечение из нижних отделов кишечника (толстая кишка, прямая кишка), то кровь будет алого цвета, возможно, в виде сгустков или примесей. Если же источник кровотечения – в верхних отделах ЖКТ (часть тонкого кишечника, пищевод, желудок), то кал превращается в черный, «дегтеобразный» за счет взаимодействия крови и особых ферментов, продуцируемых в данных отделах ЖКТ. Как правило, если имеются визуальные признаки ЖКТ-кровотечения, то ситуация острая и требует экстренных мер (неотложной помощи). Однако при менее выраженных нарушениях целостности слизистой оболочки ЖКТ, с вовлечением в процесс малого количества сосудов, цвет и консистенция кала не меняются, но эритроциты в кале будут видны при микроскопическом исследовании. Если же микроскопически эритроциты не видны, а подозрение на скрытое кровотечение есть, в таком случае и требуется анализ кала на скрытую кровь. Данное исследование осуществляется с помощью измерения количества измененного гемоглобина (а не самих эритроцитов).

Положительная реакция кала на скрытую кровь означает, что у человека имеются болезни желудочно-кишечного тракта, вызывающие нарушение целостности слизистой, когда в просвет желудка или кишки выделяется небольшое количество крови. Это может происходить при язве желудка или двенадцатиперстной кишки, неспецифическом язвенном колите, болезни Крона, полипах, инвазиях гельминтами. Так как опухоли, первичные и метастатические, вызывают поражения слизистой ЖКТ даже при незначительных размерах, исследование используется на первом этапе выявления опухолей ЖКТ. Особенно важно определение скрытой крови при диагностике рака толстой кишки, поскольку именно при опухолях в данном отделе кишечника скрытое кровотечение начинается на самых ранних стадиях.

Кровь в кале может обнаруживаться и при носовых кровотечениях, кровотечениях из десен и глотки, у больных с варикозно-расширенными венами пищевода, эрозивным эзофагитом, при геморрое и других заболеваниях, так что необходимо обязательно учитывать это при оценке результатов анализа.

Достоверность анализа наиболее высока при его повторном проведении. Отрицательные результаты теста не исключают возможного наличия у пациента эрозивно-язвенного или опухолевого поражения ЖКТ. Важно, что результаты должны оцениваться в комплексе с другими инструментальными и лабораторными исследованиями, так как сами по себе не могут быть единственным критерием для постановки диагноза.

Иногда все исследования кала на скрытую кровь ошибочно называют пробой или реакцией Грегерсена, ошибочно – потому что реакция Грегерсена (бензидиновая проба) – это самый распространенный, но не единственный метод обнаружения скрытой крови в кале, моче, рвотных массах и т. д.

Для чего используется исследование?

Для диагностики заболеваний ЖКТ, сопровождающихся нарушениями целостности слизистой оболочки (язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, первичные и метастатические опухоли пищевода, желудка, толстого и тонкого кишечника, дуоденального сосочка, туберкулез кишечника, неспецифический язвенный колит, гельминтозы).
Чтобы оценить степень повреждения слизистой оболочки ЖКТ.
Чтобы оценить адекватность терапии язвенной болезни желудка, НЯК, болезни Крона, туберкулеза кишечника.
Чтобы оценить тяжесть заболевания ЖКТ и дать его прогноз.

Когда назначается исследование?

При болях в животе, изжоге, тошноте, рвоте.
При частом кашицеобразном стуле, ложных позывах к дефекации, запорах, болях в животе, потере веса, потере аппетита, повышении температуры тела.
При выявленных опухолях ЖКТ (инструментальными методами) для исключения скрытых кровотечений ЖКТ.
При обнаружении гельминтов – для оценки повреждения слизистых ЖКТ.
Если у пациента ранее была диагностирована язва желудка (неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, полипоз, туберкулез кишечника).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

колоректальный рак,
первичные и метастатические опухоли пищевода, желудка, кишечника, дуоденального сосочка,
язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки,
неспецифический язвенный колит,
туберкулез кишечника,
гельминтозы, травмирующие стенку кишечника,
расширение вен пищевода при циррозе печени и тромбофлебите селезеночной вены,
болезнь Рандю – Ослера,
эрозивный эзофагит,
носовые кровотечения,
стоматиты, пародонтоз,
геморрой.

Отрицательный результат не является диагностически значимым.

Что может влиять на результат?

При некоторых методах определения скрытой крови употребление в пищу определенных продуктов и препаратов, окрашивающих стул, дает ложноположительную реакцию.

Кто назначает исследование?

Гастроэнтеролог, терапевт, онколог, хирург, врач общей практики.

Источник

Бензидиновая проба кала на скрытую кровь (реакция Грегерсена)

Бензидиновая проба (англ. benzidine test) на скрытую кровь — лабораторное биохимическое исследование, позволяющее установить наличие скрытой крови, не обнаруживаемой визуально, в кале.

Тест позволяет определить гемоглобин в минимальной концентрации 0,05 мг/г кала в течение 2-3 минут.

Впервые предложена в 1904 году немецко-чешским врачом-гематологом Оскаром Адлером (O. Adler, 1879-1932)* и ранее называвшаяся тест Адлера, в настоящее время чаще применяется в модификации, предложенной Дж. П. Грегерсеном (J. P. Gregersen)** и поэтому также называется проба или реакция Грегерсена.

* Adler, O., and Adler, R.: Über das Verhalten gewisser organisher Verbindungen gegenuber Blut mit besonderer Berücksichtigung des Nachweises von Blut, Ztschr. f. physoil. Chem. 41:59, 1904.
** Gregersen, J.P.: Untersuchungen über okkulte Blutungen, Arch. f. Verdau-Kr. 25:169, 1919.

Бензидиновая проба (реакция Грегерсена) позволяет обнаружить, в том числе, не диагностированные ранее новообразования желудочно-кишечного тракта: полипы, аденомы, выявить на ранней стадии рак прямой и толстой кишки и другие заболевания.

Бензидиновая проба в модификации Грегерсена выполняется следующим образом: смешивают 0,025 г основного бензидина и 0,1 г перекиси бария, перед исследованием добавляют 5 мл 50% раствора уксусной кислоты и взбалтывают до полного растворения бензидина. Перекись бария можно заменить перекисью водорода; в этом случае приготовляют насыщенный раствор бензидина в уксусной кислоте и смешивают его с равным количеством 3% раствора перекиси водорода.

Исследуемый кал размазывают тонким слоем на предметном стекле и наносят на него несколько капель реактива. При наличии крови происходит яркое синее или зеленое окрашивание.

Положительная реакция указывает на кровотечение в любом участке желудочно-кишечного тракта: кровотечение из десен, разрыв варикозных вен пищевода, эрозивные и язвенные поражения ЖКТ, опухоли любого отдела ЖКТ в стадии распада (Бубнова С.С. и др.), при инвазии власоглавом, после употребления жареного мяса, многих сортов колбас, ветчины, помидоров, яблок, орехов, слив, ананасов, бананов, а также при приёме некоторых медикаментов, содержащих железо и висмут (Гриднев А.Е.).

Основным недостатком данного метода является невозможность определить, что именно является причиной положительного ответа: скрытая кровь из тканей желудочно-кишечного тракта или, например, дёсен, или употребление мясных и некоторых других продуктов, или приём лекарственных препаратов.

Согласно Номенклатуре медицинских услуг, утверждённой Приказом Минздравсоцразвития России № 1664н от 27.12.2011 г., бензидиновая проба, также как и любое другое исследование кала на скрытую кровь, имеет код услуги A09.19.001.

Бензидиновая проба также применяется для определения наличия скрытой крови в моче, содержимом желудка или других биологических жидкостях. Для этого исследуемый жидкий материал в объёме 1 мл помещают в пробирку и добавляют 5-6 капель реактива. Изменение цвета на зелёный или синий говорит о наличии крови.

Подготовка пациента к бензидиновой пробе

Материалы для врачей и студентов медицинских учебных заведений, затрагивающие вопросы лабораторного исследования кала

Учебное пособие

Бунова С.С., Рыбкина Л.Б., Усачева Е.В. Лабораторные и инструментальные методы диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта: учебное пособие для студентов // Омск: Изд-во ОмГМА. — 2014. 57 с.

На сайте www.GastroScan.ru в разделе «Литература» имеется подраздел «Методы исследования и диагностики», содержащий работы по проблемам лабораторной и инструментальной диагностики заболеваний пищеварительного тракта.

Видео

На сайте www.GastroScan.ru в разделе «Видео» имеются подраздел для пациентов «Популярная гастроэнтерология» и подраздел «Для врачей», содержащий видеозаписи докладов, лекций, вебинаров по различным направлениям гастроэнтерологии для профессионалов здравоохранения.

Внимание! Существуют разные модификации бензидинового теста (пробы Грегерсена). Перед самостоятельным использованием таких тестов, перед сдачей стула на исследование и в отношении подготовки к сдаче пробы требуются консультации специалиста.

Результаты бензидинового теста (пробы Грегерсена) дают важную информацию о состоянии здоровья, но не являются диагнозом!

Источник

Анализ кала на скрытую кровь

Анализ кала на скрытую кровь – лабораторный тест для диагностики кровотечений в различных отделах ЖКТ.

Наличие крови в кале далеко не всегда удается обнаружить невооруженным глазом — скрытая кровь не изменяет цвет кала, не видна под микроскопом и проявляется лишь в присутствии реагентов. Поэтому этот анализ считается базовым индикатором начальной стадии опасных патологий ЖКТ.

Анализ кала на скрытую кровь назначает врач-терапевт или узкий специалист: хирург, онколог, гастроэнтеролог.

Лаборатория Поликлиники Отрадное обеспечивает оперативное выполнение теста на скрытую кровь в кале с получением результатов в течение суток. При необходимости, возможен выезд медицинской сестры для забора биоматериала на дом.

Когда назначается анализ

До 40-50 лет профилактический тест на скрытую кровь сдают только по итогам тревожных результатов других анализов, а также при наличии определенных симптомов и неблагоприятной наследственности.

Поводом для проведения срочного анализа являются:

недифференцированные боли в области живота;
железистый привкус во рту;
изжога;
снижение аппетита;
беспричинное повышение температуры;
постоянная тошнота с периодическими приступами рвоты при отсутствии явных признаков ЖКТ-заболеваний;
необъяснимые изменения стула различного характера (слишком жидкий или слишком плотный, с пенистыми или слизистыми вкраплениями);
неожиданное снижение массы тела.

На заметку! Регулярный тест на скрытую кровь в кале рекомендуют сдавать людям старше 50 и всем, у кого есть подозрение на синдром Линча – наследственную предрасположенность пациента к онкологическим процессам в толстом кишечнике. Вычисляется на основании семейного анамнеза (наличие рака прямой кишки минимум у 3-х кровных родственников в 2-х поколениях).

Виды анализов на скрытую кровь

Тест имеет несколько разновидностей:

гваяковая проба (реакция Вебера-Ван Деена);
бензидиновая проба (в модификации Грегерсена);
иммунохимический (иммунохроматографический) тест.

На заметку! Отдельно стоит упомянуть флуоресцентный анализ. В этом случае следы молекул гемоглобина выявляют через продукты его распада – порфирины, которые обладают высоким коэффициентом светопоглощения и демонстрируют флуоресцентное свечение. Однако в странах СНГ этот метод практически не применяется.

Гваяковая и бензидиновая пробы

Гваяковая проба – самый старый метод исследования кала на скрытую кровь, впервые применен в 1864 году Ван-Дееном. Суть заключается в окрашивании пероксидаз гема (окисленных пероксидом водорода соединений гемоглобина) спиртовым раствором гваяковой смолы в синий цвет. Схожему окрашиванию подвергаются и другие пероксидазы, в том числе в составе красного мяса, некоторых фруктов и овощей, поэтому без соблюдения строгой диеты получить точный результат невозможно. Но главный «минус» кроется в низкой чувствительности гваякового анализа: реакция визуально заметна только при кровопотерях от 30 мл. При таком раскладе процент успешного обнаружения онкологических заболеваний ЖКТ составляет не более 15-30 %.

Бензидиновая проба – усовершенствованный вариант химического анализа. Принцип действия схож с гваяковым тестом, но в качестве реагента выступает раствор бензидина в уксусной кислоте с примесью пероксида водорода (или бария – модификация по Грегерсену). В присутствии крови образец окрашивается в синий или сине-зеленый цвет. Аналогично гваяковой пробе, бензидиновая дает положительное окрашивание на пигменты мяса и некоторых фруктов и овощей, но выгодно отличается высокой чувствительностью (1:100 000).

Специфика подготовки к гваяковому и бензидиновому тестам

Неспецифичность реагентов к типу пигмента требует строгой предварительной подготовки:

За 72 часа до сдачи биоматериала исключите из своего меню животный гемоглобин (все виды мяса и рыбы), а также морепродукты, красные и зеленые фрукты/овощи, гречневую кашу, семечки/орехи, отруби и лекарственные препараты с содержанием железа.
Избегайте любых продуктов, способных повредить ЖКТ (сухарики и сушки, твердые неочищенные злаки, карамельные конфеты).
Откажитесь от лекарств, усиливающих перистальтику кишечника, и противовоспалительных средств.
Если у вас есть склонность к кровоточивости десен за 2-3 дня прекратите использовать зубную щетку или замените щетину на более мягкую.
За сутки до сбора биоматериала откажитесь от клизм, ректальных свечей и слабительных препаратов.
Все инструментальные и аппаратные методики обследования (колоносокопия, ректороманоскопия, КТ, рентген) проводятся после теста на скрытую кровь или не позднее, чем за неделю до него.

Иммунохимический анализ

Основан на реакции взаимодействия человеческого гема с высокоспецифичными антителами, которые не образуют соединений с животными или растительными пигментами. Анализ еще называют иммунохроматографическим тестом, так как он действует по принципу хроматографии: образец кала тонким слоем наносят на тест-полоску и подвергают воздействию моноклональных антигенов в специальном аппарате. Если в образце имеется скрытая кровь, контрольная область тест-полоски окрасится розово-фиолетовым цветом. Тест отличается высокой точностью и практически исключает вероятность ошибки.

На заметку! Иммунохимический анализ можно проводить самостоятельно в домашних условиях (в аптеках продают специальные приборы самодиагностики), однако при таком подходе достоверность анализа ниже (необходимо многократное подтверждение).

Подготовка к иммунохимическому анализу менее специфична, чем к бензидиновой пробе, и не требует соблюдения специальной диеты. Все остальные рекомендации остаются в силе.

Правила забора анализа

Забор материала удобнее проводить рано утром, до завтрака:

Тщательно вымойте область промежности обычным неароматизированным мылом и теплой водой.
Для дефекации возьмите специально подготовленную отдельную тару – чистую и сухую. Сам процесс дефекации должен быть естественным; вспомогательные лекарства и клизмы недопустимы.
В стерильную посуду отберите из разных участков испражнений примерно 2-3 чайных ложки каловых масс. Надежнее всего использовать специальный пластиковый контейнер (продается в любой аптеке). Альтернативой может стать тщательно вымытая и высушенная стеклянная баночка с плотно прилегающей крышкой.
Доставьте собранный образец в лабораторию. Лучше всего сделать это сразу (в течение 1-2 часов). Если проблемы с дефекацией не позволяют осуществить этот процесс утром, допускается хранение тары в холодильнике в течение 12-ти часов.

Внимание! Результаты анализа нельзя считать достоверными, если у пациента на момент забора биоматериала были отмечены диспепсия, гематурия, пародонтоз, носовые кровотечения, менструации, кровоточащие геморроидальные узлы (конечно, если заболевание уже диагностировано). В этих случаях, а также после инструментальных обследования ЖКТ анализ на скрытую кровь будет положительным.

Расшифровка результатов анализа на скрытую кровь

Итоги анализа выдаются по системе “+/-” с указанием качественного и количественного результата теста.

Цифровое определение количества невозможно, так как скрытая кровь проявляется наличием окраски и степенью ее интенсивности. Чем насыщеннее окраска бензидиновой пробы и розово-фиолетового спектра на хроматограмме иммунохимического анализа, тем выше уровень скрытой крови в биоматериале.

Отрицательная реакция на скрытую кровь является нормой. Положительный ответ указывается в так называемых «пойнтах» от «+» до «++++» и говорит об интенсивности кровотечения.

Источник

Как приготовить бензидиновую пробу