Как приготовить фуксин циля для окраски
Кристаллвиолет (метиловый фиолетовый), водный раствор : метиловый фиолетовый кристаллический – 7 г, этиловый спирт
96 ° -ный – 100 мл, вода дистиллированная – 900 мл. Раствор устойчив.
Фуксин основной, насыщенный спиртовой раствор: фуксин основной кристаллический – 10 г, этиловый спирт 96 ° -ный – 100 мл. Раствор может хранится долгое время в бутылке из тёмного стекла.
Фуксин основной карболовый – фуксин Циля: фуксин основной кристаллический – 1 г, карболовая кислота (фенол) – 5 г, этиловый спирт 96 ° -ный – 10 мл, вода дистиллированная – 100 мл. К спиртовому раствору основного фуксина приливают 5%-ный раствор фенола (воду для его приготовления подогревают до 50 ° С), добавляют несколько капель глицерина. Настаивают в термостате 48 ч и фильтруют через бумажный фильтр. Раствор устойчив. Хранят в укупоренной таре.
Фуксин Пфейффера: карболовый фуксин Циля – 1мл, вода дистиллированная – 9 мл. Готовят на срок не более 10 дней.
Фуксин основной, водный раствор: фуксин основной, насыщенный спиртовой раствор – 1 мл, вода дистиллированная – 9мл. Раствор устойчив.
Метиленовый синий, насыщенный спиртовой раствор: метиленовый синий кристаллический – 10 г, этиловый спирт 96 ° -ный – 100 мл. Оставляют на 2-3 дня в термостате, периодически встряхивая, а затем фильтруют. Раствор устойчив.
Метиленовый синий, водный раствор: насыщенный спиртовой раствор метиленового синего – 1 мл, вода дистиллированная – 9 мл. Раствор устойчив.
Уксуснокислый синий Нейссера: готовят два раствора –
1. Метиленовый синий кристаллический – 0,1 г, этиловый спирт 96 ° -ный – 2 мл, уксусная кислота ледяная – 5 мл, вода дистиллированная – 100 мл;
2. Метиловый фиолетовый кристаллический – 0,1 г, этиловый спирт 96 ° -ный – 1 мл, вода дистиллированная – 30 мл. Перед употреблением смешивают две части первого раствора с одной частью второго. Раствор неустойчив.
Раствор хризоидина: хризоидин кристаллический – 1,0 г, вода дистиллированная горячая – 300 мл. Горячий раствор фильтруют через бумажный фильтр, после охлаждения готов к употреблению.
Эритрозин карболовый, г: эритрозин кристаллический – 3, фенол (карболовая кислота) – 5, вода дистиллированная – 100 мл. Карболовую кислоту растворяют в воде, нагретой до 50 ° С, добавляют эритрозин, отстаивают и фильтруют через бумажный складчатый фильтр.
Раствор Люголя (для окраски по Граму), г: йод кристаллический– 1, калий йодистый – 2, вода дистиллированная – 300 мл. Навеску йода и йодистого калия растирают в ступке пестиком, доливают 1 мл воды и растирают, добавляют еще 5 мл воды, продолжая растирать. Когда кристаллы растворятся, доливают всю оставшуюся порцию воды. Хранят в темной посуде. Срок годности не более 30 дней.
Раствор Люголя (крепкий, для выявления гранулёзы), г: йод кристаллический – 7, калий йодистый – 20, вода дистиллированная – 100 мл. Раствор готовят так же, как и предыдущий.
Бумажки Синёва: нарезают кусочки фильтровальной бумаги размером 2×3 см; готовят 0,5%-ный спиртовой раствор кристаллвиолета; пропитывают бумажки 2-3 раза в этом растворе, высушивают; хранят защищенными от действия света.
Реактив Несслера, г: KJ – 7, HgJ 2– 10, KOH – 10. Готовят два раствора: 1. Навески KJ и HgJ 2 растворяют в 40 мл дистиллированной воды. 2. Навеску КОН растворяют в 40 мл дистиллированной воды. Растворы 1 и 2 смешивают и доводят общий объём до 100 мл. Хранят в темной стеклянной посуде. В продаже имеется готовый реактив Несслера.
Цинк-йод-крахмал: 2 г хлористого цинка ( ZnCl 2) растворяют в 100 мл дистиллированной воды, нагревают до кипения и приливают растворённый крахмал (0,4 г крахмала в 10 мл воды). Объём смеси доводят водой до 100 мл, кипятят до тех пор, пока она не станет прозрачной, охлаждают (можно настаивать неделю) и добавляют 100 мл 0,2 %-ного раствора йодистого калия (0,2 г KJ в 100 мл воды) или йодистого цинка.
Дифениламин: 1 г дифениламина (С6Н5-NН-С6Н5) растворяют в 100 мл крепкой серной кислоты и полученный раствор приливают к
20 мл дистиллированной воды.
Уксуснокислый свинец: 10 г уксуснокислого свинца Pb ( CH 3 COO )2 растворяют в 100 мл воды и приливают 10%-ный раствор NaOH (10 г щелочи на 100 мл воды) до исчезновения осадка.
Источник
ПРИГОТОВЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ КРАСИТЕЛЕЙ И ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
КРАСИТЕЛИ
Фуксин основной спиртовой раствор – насыщенный
Фуксин основной кристаллический – 10 г
Этиловый спирт, 96% — 100 мл
Фуксин растворяют в 100 мл 96%-ного этанола. Раствор может храниться долгое время в бутылке из темного стекла с притертой пробкой.
Фуксин основной карболовый – фуксин Циля
Фуксин основной кристаллический – 1 г
Карболовая кислота (фенол) — 5 г
Этиловый спирт, 96° — 10 мл
Дистиллированная вода — 100 мл
При приготовлении раствора предварительно взвешивают определенное количество (1 г) фуксина основного кристаллического, вносят в фарфоровую ступку и растирают с определенным количеством (5 г) карболовой кислоты, добавляя спирт небольшими порциями и дистиллированную воду до полного растворения кристаллов, после чего приливают оставшуюся воду. Приготовленный краситель ставят в термостат при 37 °С на двое суток. Затем отфильтровывают через складчатый бумажный фильтр.
Фуксин основной карболовый устойчив и может храниться долго. Хранить следует в бутылке из темного стекла с притертой пробкой.
Фуксин основной карболовый можно приготовить другим способом:
Вначале готовят два раствора.
Фуксин основной кристаллический – 1 г
Этиловый спирт, 96° — 10 мл
Смесь растирают в фарфоровой ступке до полного растворения кристаллов фуксина.
Карболовая кислота – 5 г
Дистиллированная вода – 95 мл
Воду подогревают до 50 °С для лучшего растворения карболовой кислоты. Второй раствор вливают в первый, хорошо взбалтывают и фильтруют через складчатый бумажный фильтр.
Фуксин основной, водный (фуксин Пфейффера)
Карболовый фуксин Циля – 10 мл
Дистиллированная вода — 90 мл
Водный фуксин нестоек, его лучше готовить непосредственно перед употреблением. Раствор водного фуксина может храниться не более 10 дней.
Карболовый генциановый фиолетовый
Генциановый фиолетовый (кристаллы) – 1 г
Этиловый спирт,96% — 10 мл
Карболовая кислота — 5 г
Дистиллированная вода — 100 мл
Техника приготовления карболового генцианового фиолетового такая же, как карболового фуксина Циля.
При приготовлении карболового генцианового фиолетового можно также готовить предварительно два раствора.
Генциановый фиолетовый – 1 г
Этиловый спирт, 96% — 10 мл
Карболовая кислота – 5 г
Дистиллированная вода – 95 мл
Последовательность и способ приготовления первого и второго растворов такие же, как и при приготовлении карболового фуксина Циля.
Источник
2. Рецепты приготовления красок и реактивов для окрашивания бактериальных препаратов
Принцип приготовления насыщенных спиртовых растворов красок
В основе приготовления многих красящих растворов лежит предварительное получение насыщенных спиртовых растворов красок, способ изготовления которых в принципе одинаков для всех красителей.
Порошки красок в определенном для каждого красителя количестве (указанном ниже) высыпают во флаконы, заливают 96 % этиловым спиртом и ставят на 18–24 ч в термостат с 37 °С, периодически взбалтывая.
В течение указанного времени значительная часть краски растворяется, оставляя только на дне флакона небольшой осадок.
Насыщенные растворы красок могут храниться долгое время во флаконах темного стекла со стеклянными притертыми крышками или резиновыми пробками.
Принцип приготовления рабочих спиртоводных растворов красок
Спиртоводные растворы красок готовят из насыщенных спиртовых растворов. Для этого в небольшое количество насыщенного спиртового раствора краски добавляют дистиллированную воду в разных соотношениях (в зависимости от красителя).
Рецепт 7. Насыщенный спиртовой раствор метиленового синего
Метиленовый синий 8,0–9,0 г
Этиловый 96 % спирт 100 мл
Краска при периодическом помешивании должна настояться при комнатной темп
Рецепт 8. Спиртоводный раствор метиленового синего
Метиленовый синий насыщенный
раствор (8–9 %) 1 мл
Этиловый 96 % спирт 10 мл
Дистиллированная вода 100 мл
Рецепт 9. Щелочные растворы метиленового синего Леффлера
Дистиллированная вода 100 мл
10 % раствор гидроксида калия 2 капли
Насыщенный 7 % раствор
метиленового синего 30 мл
ературе или в термостате.
Пропись 2
Метиленовый синий 3,0 г
Этиловый 96 % спирт 20 мл
1 % раствор гидроксида калия
(КОН) 1 мл
Дистиллированная вода 100 мл
Перемешать в указанном порядке перечисленные выше ингредиенты. Краска должна быть подвергнута «созреванию», которое протекает в течение нескольких месяцев. Процесс «созревания» может быть ускорен при аэрации раствора. Для этого посуду заполняют краской не более чем наполовину, вместо пробки используют рыхлый ватный тампон. Содержимое флакона должно часто перемешиваться. Во время хранения свойства краски улучшаются.
Щелочные растворы метиленового синего устойчивы и могут храниться во флаконе со стеклянной или резиновой пробкой длительное время, не изменяя своих свойств.
Рецепт 10. Синька Нейссера
Готовят отдельно два основных раствора.
Метиленовый синий 0,1 г
Этиловый 96 % спирт 2 мл
Ледяная уксусная кислота 5 мл
Дистиллированная вода 100 мл
Кристаллический фиолетовый
насыщенный спиртовой раствор 1 мл
Этиловый 96 % спирт 10 мл
Дистиллированная вода 300 мл
Для окраски зерен валютина непосредственно перед окраской смешивают 2 части первого раствора с 1 частью второго раствора.
Метиленовый синий 0,1 г
Этиловый 96 % спирт 5 мл
Ледяная уксусная кислота 5 мл
Дистиллированная вода 100 мл
Хризойдин или везувин 1,0 г
Дистиллированная вода 300 мл
Краску растворяют в кипящей воде и фильтруют через бумагу. Для приготовления рабочего раствора непосредственно перед применением смешать 2 части раствора первой краски и 1 часть раствора второй краски.
Рецепт 11. Водный раствор метиленового синего
Метиленовый синий 1,0 г
Дистиллированная вода 1000 мл
Применяется для ориентировочной окраски препаратов, при окраске по Цилю–Нильсену кислотоустойчивых бактерий, дает отчетливо окрашенные клетки микроорганизмов на нежно-голубом фоне.
Кристаллический фиолетовый всегда может быть заменен генциановым или метиловым фиолетовым, поскольку эти красители относятся к одному классу химических соединений, очень близки по структуре, составу химической формулы и имеют совершенно одинаковый эффект окраски.
Рецепт 12. Насыщенный спиртовой раствор кристаллического фиолетового
Кристаллический фиолетовый 8,0–10,0 г
Этиловый 96 % спирт 100 мл
Рецепт 13. Спиртоводный раствор кристаллического фиолетового
Насыщенный спиртовой раствор
кристаллического фиолетового 1 мл
Дистиллированная вода 10 мл
Раствор нестойкий, готовится на 1–2 дня
Рецепт 14. Карболовый раствор кристаллического фиолетового
Пропись 1
Кристаллический фиолетовый 1,0 г
Фенол кристаллический 2,0 г
Этиловый 96 % спирт 10 мл
Дистиллированная вода 100 мл
Карболовый раствор кристаллического фиолетового 1 г растирают в фарфоровой ступке с 2 г кристаллической карболовой кислоты и несколькими каплями глицерина. Во время растирания небольшими порциями приливают спирт. После того как краска хорошо разотрется, приливают при постоянном помешивании 100 мл дистиллированной воды. Раствор краски фильтруют через влажный бумажный фильтр. Краска нестойкая.
Пропись 2
Насыщенный спиртовой раствор
кристаллического фиолетового 10 мл
Фенола 2 % водный раствор 100 мл
Полученную смесь тщательно взбалтывают и фильтруют через бумажный фильтр. Раствор краски нестойкий, в прок не готовится.
Рецепт 15. Фуксина насыщенный спиртовой раствор
Основной фуксин 8,0–9,0 г
Спирт 96 % этиловый 100 мл
Рецепт 16. Фуксина спиртоводный раствор
Насыщенный спиртовой раствор
фуксина 1 мл
Дистиллированная вода 10 мл
Спиртоводный раствор фуксина нестойкий, поэтому готовят его ex tempore перед окраской препаратов.
Рецепт 17. Фуксин карболовый Циля
Основной фуксин в порошке 1,0 г
Фенол кристаллический 5,0 г
Этиловый 96 % спирт 10 мл
Дистиллированная вода 100 мл
1 г основного кристаллического фуксина растирают в фарфоровой ступке с 5 г кристаллического фенола и несколькими каплями глицерина. Во время растирания фуксина с фенолом небольшими порциями добавляют спирт. После того как краска хорошо разотрется, приливают при постоянном помешивании 100 мл дистиллированной воды. Раствор краски фильтруют через влажный бумажный фильтр. Фуксин Циля очень стойкий и может храниться долгое время во флаконе темного стекла с притертой пробкой.
Насыщенный спиртовой раствор
основного фуксина 10 мл
5 % раствор карболовой
кислоты 90 мл
Карболовую кислоту вливают в краску! Смесь в течение нескольких минут энергично встряхивают, фильтруют через влажный бумажный фильтр, после чего сливают во флакон темного стекла для хранения.
Рецепт 18. Фуксин Пфейффера
Карболовый фуксин Циля 1 мл
Дистиллированная вода 9 мл
Смесь в течение нескольких минут энергично встряхивают. Полученный раствор краски очень нестойкий, поэтому его готовят в небольших количествах только для работы на текущий день.
Красители и реагенты для окраски по Граму в модификации Г.П.Калины
Рецепт 19. Бриллиантового зеленого спиртовой раствор
Бриллиантовый зеленый 0,05 г
Этиловый 96 % спирт 10 мл
Краска хранится длительное время во флаконе темного стекла, в темноте, закрытая стеклянной притертой или резиновой пробкой.
Рецепт 20. Основной реактив Калины для окраски нейссерий по Граму
5 % раствор основного фуксина
Циля 2 мл
5 % раствор спиртового раствора
йода 2 мл
0,5 % спиртовой раствор
йодида калия 96 мл
0,5 % раствор йодида калия готовится при подогревании на водяной бане. После полного растворения навески йодида калия в 96 % спирте последний соединяют с растворами фуксина и йода. Полученную смесь хранят во флаконе темного стекла с притертой пробкой в холодильнике.
Приготовление красящих бумажек по Синеву
Для приготовления красящих бумажек пользуются стандартной фильтровальной бумагой, которую предварительно испытывают на пригодность. Для этого отрезают полоску бумаги и погружают в спиртовой раствор красителя, затем высушивают на воздухе. Хорошая бумага окрашивается равномерно, без пятен. Затем от нее отрезают небольшой кусок и кладут на стекло с несколькими каплями воды. Пригодная для окраски бумага сразу пропитывается водой и через несколько секунд «отдает» краситель, вследствие чего вода вокруг становится интенсивно окрашенной в соответствующий цвет. Если этого не происходит, бумага для приготовления красящих бумажек непригодна.
Техника приготовления красящих бумажек. Краситель, предназначенный для пропитывания бумаги, наливают в лоток или глубокую тарелку. Бумагу нарезают в виде полосок шириной 2–2,5 см и длиной 30–50 см. Полоску погружают на несколько секунд в краситель так, чтобы смачивались обе ее поверхности. Окрашенные полосы вынимают пинцетом, дают красителю стечь и подвешивают на веревке для высушивания. Бумагу сушат на воздухе при комнатной температуре или в термостате при 37–50 °С. Высушенные полоски бумаги разрезают на кусочки размером 2×2 или 2×4,5 см.
Рецепт 26. Прописи растворов красителей для приготовления бумаги
- Кристаллический генциановый или метиловый фиолетовый для окраски по Граму
Кристаллический фиолетовый 1,0 г
Этиловый 96 % спирт 100 мл
Этиловый 96 % спирт 100 мл
Пропись обычная: на 100 мл приготовленного красителя добавляют 1–2 мл глицерина
Источник