- Как приготовить мазок гноя
- Приготовление мазков из испражнений
- Приготовление микропрепаратов из мокроты, мочи и спинномозговой жидкости
- Приготовление препарата «мазок – отпечаток» из органов инфицированного макроорганизма
- Микробиологическое исследование гноя и отделяемого из раны
- Приготовление мазков
- Подготовка к исследованию мокроты и слюны
- Правила сбора мокроты
- Общие правила сбора слюны
- Правила сбора слюны для исследований «Кортизол в слюне»
- Мокрота. Общая клиника
- Мокрота. Туберкулез
- Посев мокроты на микрофлору и чувствительность к антибиотикам
- Мокрота. Анаэробы и чувствительность к антибиотикам
- Мокрота. На грибы Candida
- Мокрота. Микроскопические грибы (комплекс)
- Сбор мокроты у детей
Как приготовить мазок гноя
Существует целый ряд заболеваний, клинический диагноз которых (малярия, возвратный тиф и др.) может быть подтвержден при помощи микроскопических исследований фиксированных и окрашенных тонких мазков из периферической крови или в препаратах «толстой капли» крови.
Кровь берут из пальца, предварительно протертого спиртом, уколов его стерильной иглой. Для приготовления тонкого мазка хорошо обезжиренное предметное стекло прикладывают к месту укола на пальце и получают небольшую каплю крови .
К переднему краю капли ставят шлифованное предметное стекло под углом 45 градусов. После того как кровь растечется по краю стекла, его продвигают вперед так, чтобы на предметном стекле получился равномерный тонкий мазок. Мазки крови вначале высушивают на воздухе, а затем фиксируют метиловым спиртом или смесью Никифорова.
В том случае, когда концентрация микроорганизмов в крови невелика и их не удается обнаружить в тонких мазках, необходимо приготовить препарат «толстой капли». Для этого на предметное стекло наносят 2 – 3 капли крови, полученной при проколе мякоти пальца, и распределяют на стекле в виде пятно 10 – 15 мм. Препарат высушивают на воздухе и для разрушения эритроцитов (чтобы они не мешали обнаруживанию микробов) на мазок осторожно наносят 1 – 2 капли дистиллированной воды. Через несколько минут высушенный и зафиксированный препарат окрашивают, промывают струей воды, высушивают и изучают при помощи иммерсионного микроскопа.
Приготовление мазков из испражнений
При исследовании кроваво – слизистого или жидкого стула с целью выявления кишечных патогенных простейших начинать исследования необходимо со слизи. Отобранный кусочек слизи, наносят на предметное стекло. Для того, чтобы слой слизи был тонким, его необходимо расправить препаровальными иглами. После этого препарат накрывают покровным стеклом и исследуют микроскопически.
Таким же способом готовят мазок и из жидкого калового стула.
Мазок из оформленного или густого кашицеобразного стула готовится следующим образом: в капле физиологического раствора, предварительно нанесенной на предметное стекло, ополаскивают конец тонко заостренной деревянной палочки, предварительно погруженной в кал. Полученная взвесь накрывается покровным стеклом и производится просмотр при помощи микроскопа для первоначальной ориентировки. Точное определение паразитов осуществляется в фиксированных и окрашенных препаратах.
Исследование не окрашенных и окрашенных препаратов начинают с просмотра мазков при помощи малого увеличения. Малое увеличение дает возможность охватить большее поле зрения, и, следовательно, быстрее могут быть обнаружены паразиты. Детальное же изучение паразита проводится при помощи иммерсионного объектива.
Приготовление микропрепаратов из мокроты,
мочи и спинномозговой жидкости
Для исследования мокроты ее выливают в чашку Петри из емкости, в которой она находится. Бактериологической петлей выбирают гнойные комочки и размазывают их тонким слоем по поверхности предметного стекла.
При исследовании мочи ее собирают в сосуд. Дают ей отстояться на холоду или центрифугируют. Из полученного осадка готовят микропрепараты.
При микроскопическом исследовании спинномозговой жидкости микропрепараты готовят из фибринозного сгустка или из осадка, полученного при отстаивании или центрифугировании жидкости.
Препараты следует готовить с большой осторожностью. После того как препараты высохнут, их фиксируют и окрашивают.
Приготовление препарата «мазок – отпечаток»
из органов инфицированного макроорганизма
Необходимость приготовления мазка – отпечатка из селезенки, печени, костного мозга, лимфоидной ткани возникает по разным причинам: определить первостепенность обсеменения того или иного органа в зависимости от пути и времени проникновения возбудителя в макроорганизм, активности ответной реакции иммунокомпетентных органов, вирулентных особенностей возбудителя (отношение к капсулообразованию) и пр.
Для приготовления мазка – отпечатка необходимо стерильно сделать горизонтальный срез органа и на свежий срез быстро и аккуратно без приложения усилий накладывается стерильное обезжиренное предметное стекло. И также быстро поднимается вертикально вверх, без смещения в какую – либо сторону.
Препарат высушивается на воздухе, фиксируется в жидком фиксаторе, промывается осторожно проточной водой, высушивается, окрашивается и микроскопируется.
Источник
Микробиологическое исследование гноя и отделяемого из раны
Многие бактерии, которые колонизируют на коже и слизистых, могут способствовать возникновению инфекции кожи и мягких тканей. Остро протекающие кожные инфекции часто возникают после операций или травм. Хронические инфекции возникают по причине хронической недостаточности кровоснабжения, пролежней или нарушения обмена веществ. На появившихся ранах колонизируют различные микробы, проведение микробиологического посева показано в тех случаях, когда в ране возникают признаки воспаления (покраснение, отек, боль, повышение местной температуры, выделения) или в том случае, если заживление раны идет медленно. Лучшим материалом является аспират из раны или кусочек ткани, худшим считается материал, взятый тампоном.
Самыми частыми возбудителями раневой инфекции являются Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, энтеробактерии и анаэробы. При ожого- вых ранах материал следует брать из разных участков раны в связи с тем, что бактерии колонизируют на их поверхности неравномерно.
Показания:
- Подозрение на острую или хроническую раневую инфекцию
- Плохо заживающая рана
Исследуемый материал: Отделяемое из раны, гной, отделяемое из язвы, отделяемое из трофической язвы, материал, взятый из абсцесса
Метод анализа: Микроскопия нативного материала, аэробный посев на среды, идентификация возбудителя болезни, определение лекарственной чувствительности
Интерпретация результата:
- При микроскопии большое количество полиморфонуклеарных лейкоцитов указывает на воспалительный и инфекционный процесс, также оценивается морфология бактерий и возможность анаэробной инфекции. Если у пациента имеется иммунодефицит или нарушения кровоснабжения, то воспалительную реакцию нельзя оценивать в препарате, поскольку при наличии инфекции в самом препарате лейкоцитов может и не быть.
- NB! Многие раневые инфекции полимикробны, и появление бактерий может означать как инфекцию, так и колонизацию. Поэтому ответ, выданный лабораторией неокончателен, и необходимость лечения решается на основе всей клинической информации, микроскопической картины и конкретного изолированного возбудителя.
MEIE VEEBILEHE PARIMA KASUTAMISE HUVIDES PAIGALDATAKSE TEIE ARVUTISSE “KÜPSISEID”, MIS JÄLGIVAD LEHE KASUTAMIST. VEEBILEHE KÕIKIDE FUNKTSIONAALSUSTE KASUTAMISEKS, KLIKAKE NUPUL “OK”. LINKIDELE VAJUTADES LEIATE LÄHEMAT TEAVET MEIE ANDMEKAITSEPOLIITIKA JA “ KÜPSISTE” POLIITIKA KOHTA.
Источник
Приготовление мазков
Для изучения микроорганизмов в окрашенном виде на предметном стекле делают мазок, высушивают, фиксируют его и после этого окрашивают.
Исследуемый материал распределяют тонким слоем по поверхности хорошо обезжиренного предметного стекла.
Мазки готовят из культур микробов, патологического материала (мокрота, гной, моча, кровь и др.) и из органов трупов.
Техника приготовления мазков определяется характером исследуемого материала.
Приготовление мазков из микробных культур с жидкой питательной средой и из жидкого патологического материала (моча, ликвор и др.). Маленькую каплю исследуемой жидкости наносят бактериальной петлей на предметное стекло и круговыми движениями петли распределяют равномерным слоем в виде кружка диаметром в копеечную монету.
Приготовление мазков из крови. На предметное стекло, ближе к одному из его концов, наносят каплю крови. Второе — шлифованное — стекло, которое должно быть уже предметного, ставят на первое под углом 45° и подводят к капле крови до соприкосновения с ней. После того как кровь растечется по шлифованному краю, стеклом делают скользящее движение справа налево, равномерно распределяя кровь тонким слоем по всей поверхности стекла. Толщина мазка зависит от величины угла между стеклами: чем острее угол, тем тоньше мазок. Правильно приготовленный мазок имеет светло-розовую окраску и одинаковую толщину на всем протяжении.
Приготовление толстой капли. На середину предметного стекла пастеровской пипеткой наносят каплю крови или прикладывают стекло непосредственно к выступающей капле крови. Нанесенную на стекло кровь размазывают бактериальной петлей так, чтобы диаметр образующегося мазка соответствовал величине копеечной монеты. Стекло оставляют в горизонтальном положении до высыхания крови. Кровь в «толстой капле» распределяется неравномерно, образуя неровный край.
Приготовление мазка из вязкого материала (мокрота, гной). Мокроту или гной, нанесенные на предметное стекло ближе к узкому краю, накрывают другим предметным стеклом. Стекла слегка придавливают друг другу.
После этого свободные концы стекол захватывают 1 и 2 пальцами обеих рук и разводят в противоположные стороны так, чтобы при движении оба стекла плотно прилегали друг к другу. Получаются мазки с равномерно распределенным материалом, занимающим большую площадь.
Приготовление мазка из культур с плотных питательных сред. На середину чистого, хорошо обезжиренного предметного стекла наносят каплю воды, в нее вносят бактериальную петлю с небольшим количеством исследуемой микробной культуры, так, чтобы капля жидкости стала слегка мутноватой. После этого излишек микробного материала на петле сжигают в пламени и приступают к приготовлению мазка по вышеописанному способу.
Приготовление мазков из органов и тканей. Поверхность органа с целью обеззараживания прижигают накаленными браншами пинцета, делают по этому месту надрез и из глубины остроконечными ножницами вырезают небольшой кусочек ткани, который помещают между двумя предметными стеклами. Далее поступают так же, как при приготовлении мазка из гноя и мокроты. Если ткань органа плотная, то из глубины разреза делают скальпелем соскоб. Полученный при соскабливании материал распределяют тонким слоем по поверхности стекла скальпелем или бактериальной петлей.
Для изучения взаимного расположения элементов ткани и находящихся в ней микроорганизмов делают мазки-отпечатки. Для этого вырезанный из середины органа небольшой кусочек ткани захватывают пинцетом и прикладывают последовательно несколько раз поверхностью среза к предметному стеклу, получая, таким образом, ряд мазков-отпечатков.
Высушивание и фиксация мазков. Приготовленный на предметном стекле мазок высушивают на воздухе и после полного высыхания фиксируют. При фиксировании мазок закрепляется на поверхности предметного стекла, и поэтому при последующей окраске препарата микробные клетки не смываются. Кроме того, убитые микробные клетки окрашиваются лучше, чем живые.
Различают физический способ фиксации, в основу которого положено воздействие высокой температуры на микробную клетку, и химические способы, предусматривающие применение средств, вызывающих коагуляцию белков. Нельзя фиксировать над пламенем мазки, содержащие возбудителей I – II групп патогенности.
Физический способ фиксации. Предметное стекло с препаратом берут пинцетом или I и II пальцами правой руки за ребра мазком кверху и плавным движением проводят 2—3 раза над верхней частью пламени горелки. Весь процесс фиксации должен занимать не более 2 с. Надежность фиксации проверяют следующим простым приемом: свободную от мазка поверхность предметного стекла прикладывают к тыльной поверхности левой кисти. При правильном фиксировании мазка стекло должно быть горячим, но не вызывать ощущения ожога.
Химический способ фиксации. Для фиксации мазков применяют также химические вещества и соединения, приведенные в таблице 4.
Источник
Подготовка к исследованию мокроты и слюны
Правила сбора мокроты
Недопустимо направлять мокроту на исследование в емкостях, не предназначенных для этих целей, так как в них могут содержаться вещества, способные исказить результат анализов.
Нельзя разделять мокроту на две части для исследования в разных лабораториях, так как важные компоненты могут попасть только в один из контейнеров.
- Мокрота собирается утром, натощак. Перед сбором мокроты почистите зубы и прополощите рот водой, чтобы удалить частицы пищи и бактериальный налет. Сделайте два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд, после каждого глубокого вдоха медленно выдыхайте. Затем вдохните в третий раз и с силой выдохните (вытолкните) воздух. Еще раз вдохните и хорошо откашляйтесь.
- Поднесите контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюньте в него мокроту после откашливания. Следите, чтобы мокрота не попала на край контейнера. Не касайтесь внутренней поверхности крышки и стенок стерильного контейнера пальцами. Плотно закройте контейнер крышкой.
- Вымойте руки с мылом.
- Собранную для исследования утреннюю мокроту доставьте в лабораторию не позднее, чем через 1–1,5 часа после сбора. При этом должны быть созданы условия, исключающие ее охлаждение при транспортировке. В противном случае в мокроте быстро произойдут изменения ее качеств, состава микробных колоний, что может исказить результаты исследования.
Внимание Нельзя собирать мокроту, выделяемую при отхаркивании, только при откашливании. Попадание слюны в образец может существенно влиять на результат исследования.
Общие правила сбора слюны
Внимание! Нецелесообразно проводить исследования слюны на фоне применения глюкокортикоидных препаратов (в т.ч. мазей).
За сутки до взятия слюны не употреблять алкоголь.
- За час до сбора слюны не есть, не курить, не чистить зубы (если нет других указаний от лечащего врача).
- За 10 минут до сбора слюны прополоскать рот водой.
Правила сбора слюны для исследований «Кортизол в слюне»
- За сутки и в течение всего периода сбора слюны исключить физические нагрузки, не употреблять кофеин (чай, кофе, кофеиносодержащие энергетические напитки, продукты, жевательная резинка), алкоголь;
- За один час до сбора слюны не курить;
- За 30 минут до сбора слюны не употреблять пищу, не чистить зубы, в том числе не использовать зубную нить и ополаскиватель для полости рта, не жевать жевательную резинку;
- За 10 минут до сбора слюны прополоскать рот водой;
- Прием седативных препаратов, кортизона ацетата, эстрогенов, пероральных контрацептивов, глюкокортикоидных препаратов (в т. ч. мазей) может вызвать повышение уровня кортизола. Отмена лекарственных препаратов осуществляется строго по рекомендации лечащего врача.
Продробнее о правилах сбора слюны для исследований «Кортизол в слюне» смотрите по ссылке
Мокрота. Общая клиника
- Мокрота собирается утром, натощак. Перед сбором мокроты почистите зубы и прополощите рот водой, чтобы удалить частицы пищи и бактериальный налет. Сделайте два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд, после каждого глубокого вдоха медленно выдыхайте. Затем вдохните в третий раз и с силой выдохните (вытолкните) воздух. Еще раз вдохните и хорошо откашляйтесь.
- Поднесите контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюньте в него мокроту после откашливания. Следите, чтобы мокрота не попала на край контейнера. Не касайтесь внутренней поверхности крышки и стенок стерильного контейнера пальцами. Плотно закройте контейнер крышкой.
- Вымойте руки с мылом.
- Собранную для исследования утреннюю мокроту доставьте в лабораторию не позднее, чем через 1–1,5 часа после сбора. При этом должны быть созданы условия, исключающие ее охлаждение при транспортировке. В противном случае в мокроте быстро произойдут изменения ее качеств, состава микробных колоний, что может исказить результаты исследования.
Внимание! Нельзя собирать мокроту, отделяющуюся при отхаркивании. Попадание слюны в образец может существенно влиять на результат исследования.
Мокрота. Туберкулез
- Мокрота собирается утром, натощак. Перед сбором мокроты почистите зубы и прополощите рот водой, чтобы удалить частицы пищи и бактериальный налет. Сделайте два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд, после каждого глубокого вдоха медленно выдыхайте. Затем вдохните в третий раз и с силой выдохните (вытолкните) воздух. Еще раз вдохните и хорошо откашляйтесь.
- Поднесите контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюньте в него мокроту после откашливания. Следите, чтобы мокрота не попала на край контейнера. Не касайтесь внутренней поверхности крышки и стенок стерильного контейнера пальцами. Плотно закройте контейнер крышкой.
- Вымойте руки с мылом.
- Собранную для исследования утреннюю мокроту доставьте в лабораторию не позднее, чем через 1–1,5 часа после сбора. При этом должны быть созданы условия, исключающие ее охлаждение при транспортировке. В противном случае в мокроте быстро произойдут изменения ее качеств, состава микробных колоний, что может исказить результаты исследования.
Внимание! Нельзя собирать мокроту, выделяемую при отхаркивании, только при откашливании. Попадание слюны в образец может существенно влиять на результат исследования.
Посев мокроты на микрофлору и чувствительность к антибиотикам
Для бактериологического исследования мокроту собирают до начала антибактериальной терапии или через определенный промежуток времени после введения препарата.
Порядок сбора
- Мокрота собирается утром, натощак. Перед сбором мокроты почистите зубы и прополощите рот водой, чтобы удалить частицы пищи и бактериальный налет. Сделайте два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд, после каждого глубокого вдоха медленно выдыхайте. Затем вдохните в третий раз и с силой выдохните (вытолкните) воздух. Еще раз вдохните и хорошо откашляйтесь.
- Поднесите контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюньте в него мокроту после откашливания. Следите, чтобы мокрота не попала на край контейнера. Не касайтесь внутренней поверхности крышки и стенок стерильного контейнера пальцами. Плотно закройте контейнер крышкой.
- Вымойте руки с мылом.
- Собранную для исследования утреннюю мокроту доставьте в лабораторию. При этом должны быть созданы условия, исключающие ее охлаждение при транспортировке. В противном случае в мокроте быстро произойдут изменения ее качеств, состава микробных колоний, что может исказить результаты исследования.
Внимание! Нельзя собирать мокроту, выделяемую при отхаркивании, только при откашливании. Попадание слюны в образец может существенно влиять на результат исследования.
Мокрота. Анаэробы и чувствительность к антибиотикам
Внимание Мокрота собирается натощак.
Предварительно почистите зубы, десны и язык зубной щеткой и прополощите рот кипяченой водой комнатной температуры.
Порядок сбора
- Сделайте два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд, после каждого глубокого вдоха медленно выдыхайте. Затем вдохните в третий раз и с силой выдохните (вытолкните) воздух. Еще раз вдохните и хорошо откашляйтесь.
- Поднесите контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюньте в него мокроту после откашливания. Следите, чтобы мокрота не попала на край контейнера. Не касайтесь внутренней поверхности крышки и стенок стерильного контейнера пальцами. Плотно закройте контейнер крышкой.
- Вымойте руки с мылом.
- Собранную для исследования утреннюю мокроту доставьте в лабораторию.
Внимание! Нельзя собирать мокроту, выделяемую при отхаркивании, только при откашливании. Попадание слюны в образец может существенно влиять на результат исследования.
Мокрота. На грибы Candida
Внимание! Мокрота собирается до начала антибактериальной терапии.
Порядок сбора
- Сделайте два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд, после каждого глубокого вдоха медленно выдыхайте. Затем вдохните в третий раз и с силой выдохните (вытолкните) воздух. Еще раз вдохните и хорошо откашляйтесь.
- Поднесите контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюньте в него мокроту после откашливания. Следите, чтобы мокрота не попала на край контейнера. Не касайтесь внутренней поверхности крышки и стенок стерильного контейнера пальцами. Плотно закройте контейнер крышкой.
- Вымойте руки с мылом.
- Собранную для исследования утреннюю мокроту доставьте в лабораторию.
Мокрота. Микроскопические грибы (комплекс)
Мокрота собирается до начала антибактериальной терапии. Предварительно почистите зубы, десны и язык зубной щеткой и прополощите рот кипяченой водой комнатной температуры.
Порядок сбора
- Сделайте два глубоких вдоха, задерживая дыхание на несколько секунд, после каждого глубокого вдоха медленно выдыхайте. Затем вдохните в третий раз и с силой выдохните (вытолкните) воздух. Еще раз вдохните и хорошо откашляйтесь.
- Поднесите контейнер как можно ближе ко рту и осторожно сплюньте в него мокроту после откашливания. Следите, чтобы мокрота не попала на край контейнера. Не касайтесь внутренней поверхности крышки и стенок стерильного контейнера пальцами. Плотно закройте контейнер крышкой.
- Вымойте руки с мылом.
- Собранную для исследования утреннюю мокроту доставьте в лабораторию.
Внимание! Качественным материалом для анализа считается мокрота, имеющая слизистый или слизисто-гнойный характер, а также содержащая плотные белесоватые включения.
Сбор мокроты у детей
У детей, не умеющих откашливать мокроту и заглатывающих ее, следует поступить следующим образом:
- Вызвать рефлекторный кашель, раздражая ватным тампоном, накрученным на ручку чайной ложки область корня языка и задней стенки глотки.
- Полученную мокроту собрать этим же тампоном и поместить в контейнер.
Так же следует поступать с очень слабыми больными, которые не могут откашляться самостоятельно.
Источник