Как приготовить раствор флуоресцеина

Приложение 9. Способ приготовления 1 л водного раствора аммониевой соли флуоресцеина с концентрацией 0,1%

Способ приготовления 1 л водного раствора аммониевой соли флуоресцеина с концентрацией 0,1%

Водный раствор аммониевой соли флуоресцеина приготовляют в два этапа.

1. Получение аммониевой соли флуоресцеина путем соединения флуоресцеина раствором аммиака по реакции:

Для получения 1 г аммониевой соли флуоресцеина требуется:

25%-ного раствора аммиака .

Рекомендуется растереть порошок флуоресцеина и перемешать с аммиаком при добавке небольшого количества воды до получения однородной массы без комков. Полученный раствор следует профильтровать через сито или марлю для освобождения от нерастворенного осадка.

2. Полученную аммониевую соль флуоресцеина, очищенную от нерастворимого осадка, растворяют в 1 л воды высокой чистоты, дистиллированной или водопроводной, перемешивая при нормальных условиях.

3. Для приготовления большого количества раствора аммониевой соли флуоресцеина количество флуоресцеина и 25%-ного раствора аммиака увеличивается пропорционально.

4. Хранение водного раствора аммониевой соли флуоресцеина рекомендуется в стеклянных или металлических емкостях.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Источник

Флуоресцеин

Этот синтез проводят в пробирке из тугоплавкого стекла диаметром 25-30 мм и вы­сотой 120-150 мм. Реакционную смесь нагревают на металлической бане (сплав Вуда), куда погружают на 1/3 высоты пробирку, укрепленную в лапке. Обогрев бани произво­дят газовой горелкой. Температура начала плавления металла в бане около 100 о С. Тем­пературу контролируют термометром, который помещают в расплавленный металл ря­дом с пробиркой. Температура в реакционной смеси примерно на 10 о С ниже температу­ры в бане. Перед охлаждением бани из расплавленного металла следует извлечь про­бирку и термометр, прилипшие к стеклу кусочки металла снять палочкой и бросить в баню.

В пробирку вносят 11,2 г (0,1 моль) резорцина, его расплавляют, нагревая пробирке в бане от 100 о С до 150 о С. Когда весь резорцин расплавится, к нему порциями при пере­мешивании стеклянной палочкой добавляю 7,5 г (0,05 моль) измельченного фталевого ангидрида. Смесь нагревают до 185 о С и выдерживают при этой температуре 30-40 мин при периодическом перемешивании. К образовавшемуся жидкому тетрагидроксифта­лофенону при перемешивании за 5 мин прибавляю 5 г безводного порошкообразного хлористого цинка.

Перед синтезом необходимое количество кристаллогидрата ZnCl₂ обезвоживают плавлением в ложке из нержавеющей стали на открытом пламени горелки при 250 о С. Плав выливают в сухую холодную ступку, измельчают и переносят в бюкс с хорошо притертой пробкой. (Внимание! Прибавление к расплавленной реакционной смеси обводненного хлористого цинка вызывает вспенивание и даже выброс содержимого пробирки).

Затем плав перемешивают еще 5 мин и постепенно повышают температуру до 210 – 215 о С. Когда масса начнет затвердевать, палочку вынимают, пробирку накрывают ча­совым стеклом и выдерживают еще 2 ч до полного затвердевания реакционной смеси.

Далее пробирку вынимают из металлической бани, её поверхность очищают сухой тряпочкой, охлаждают, пробирку аккуратно разбивают в ступке, удаляют стекло и плав измельчают в порошок. Выход продукта составляет около 20 г.

Полученный порошок переносят в стакан с 180 мл воды, к которой добавлено 3 мл 35%-й соляной кислоты, и кипятят 10 мин. Осадок отфильтровывают на воронке Бюхнера, промывают горячей водой и высушивают на воздухе.

Для очистки сухой краситель переносят в бумажную гильзу, её помещают в экстрак­тор Сокслета и экстрагируют 60 мл кипящего этанола, до тех пор пока, стекающий спирт не будет окрашен лишь в слабо-желтый цвет. Так удаляют непрореагировавший фталофенон. Экстракцию можно заменить двукратным кипячением вещества в 140 мл этанола (пропанола) в течение 15 мин, каждый раз отделяя осадок горячим фильтрова­нием через складчатый фильтр. Экстракцию следует вести в колбе с обратным холо­дильником.

Нерастворимый в спирте краситель (около 15 г) растворяют при перемешивании в стакане с раствором 4 г едкого натра в 300 мл воды, нагретом до 50 о С. Интенсивно жел­тый раствор с зеленой флуоресценцией профильтровывают, фильтрат переносят в ста­кан и при перемешивании по каплям прибавляют раствор 10 мл ледяной уксусной кис­лоты в 30–35 мл воды. Через 30 мин желтый осадок отфильтровывают, промывают на фильтре 2 раза 100 мл холодной воды, отжимают и высушивают на воздухе при 50 о С.

Обычно получают около 14 г (84%) флуоресцеина.

5,00 г (0,034 моль) фта­ле­во­го ан­гид­ри­да тща­тель­но рас­ти­ра­ют в ступ­ке с 7,30 г (0,066 моль) ре­зор­ци­на, смесь по­ме­ща­ют в про­бир­ку из тер­мо­стой­ко­го стек­ла и на­гре­ва­ют на ме­тал­ли­че­ской ба­не до 180 о С. В рас­плав­лен­ную мас­су в те­че­ние 10 мин при пе­ре­ме­ши­ва­нии стек­лян­ной па­лоч­кой вно­сят не­боль­ши­ми пор­ция­ми 3,0 г без­вод­но­го Zn­Cl₂ , за­тем тем­пе­ра­ту­ру по­вы­ша­ют до 210С и на­гре­ва­ют до тех пор, по­ка гус­тею­щая мас­са не ста­нет со­вер­шен­но твер­дой. На это ухо­дит 1-2 ч. Про­бир­ку из­вле­ка­ют из ба­ни, ох­ла­ж­да­ют, ос­то­рож­но раз­би­ва­ют в ступ­ке, из­вле­ка­ют ос­кол­ки стек­ла и плав из­мель­ча­ют в по­ро­шок.

По­лу­чен­ный пре­па­рат ки­пя­тят 15 мин в кол­бе, со­дер­жа­щей смесь 70 мл во­ды и 3 мл 33%-й со­ля­ной ки­сло­ты. За­тем оса­док от­фильт­ро­вы­ва­ют, про­мы­ва­ют во­дой до поч­ти ней­траль­ной ре­ак­ции фильт­ра­та по уни­вер­саль­ной ин­ди­ка­тор­ной бу­ма­ге и вы­су­ши­ва­ют при 60-70С.

По­лу­ча­ют 10,4-10,7 г (95-98%) флуо­рес­цеи­на.

5,00 г (0,015 моль) мел­ко рас­тер­то­го в ступ­ке флуо­рес­цеи­на сус­пен­ди­ру­ют в 30 мл эта­но­ла, по­ме­щен­но­го в че­ты­рех­гор­лой кол­бе, снаб­жен­ной ме­шал­кой, тер­мо­мет­ром и ка­пель­ной во­рон­кой. К пе­ре­ме­ши­вае­мой сус­пен­зии при­бав­ля­ют в те­че­ние 15 мин по ка­п­лям 4,5 мл (0,087 моль) бро­ма (ос­то­рож­но, яд!) и смесь вы­дер­жи­ва­ют 2 ч при ком­нат­ной тем­пе­ра­ту­ре. Кри­стал­ли­че­ский оса­док от­фильт­ро­вы­ва­ют и вы­су­ши­ва­ют на воз­ду­хе. Для по­лу­че­ния на­трие­вой со­ли Эо­зи­на, лег­ко рас­тво­ри­мой в во­де, пре­па­рат рас­ти­ра­ют в ступ­ке с 1/6 ве­со­вой ча­стью (1,56 г, 0,0157 моль) Na₂CO₃ , при­бав­ля­ют 10 мл эта­но­ла и 20 мл во­ды и смесь на­гре­ва­ют на во­дя­ной ба­не до пре­кра­ще­ния вы­де­ле­ния уг­ле­ки­сло­го га­за.

К по­лу­чен­но­му рас­тво­ру на­трие­вой со­ли Эо­зи­на до­бав­ля­ют еще 20 мл эта­но­ла, на­гре­ва­ют до 60-70С и фильт­ру­ют че­рез склад­ча­тый фильтр. Че­рез не­сколь­ко ча­сов из фильт­ра­та вы­па­да­ют кри­стал­лы кра­си­те­ля, ко­то­рые от­фильт­ро­вы­ва­ют, про­мы­ва­ют на фильт­ре не­боль­шим ко­ли­че­ст­вом сме­си эта­но­ла и ди­эти­ло­во­го эфи­ра (1:1) и вы­су­ши­ва­ют при 35-40С.

По­лу­ча­ют 7-8 г (65-70%) на­трие­вой со­ли Эо­зи­на.

Источник

Химический опыт – получаем флуоресцеин

Флуоресцеин является ярким химическим красителем, который светится в ультрафиолетовых лучах. Получению именно этого химического вещества посвящен данный материал, который обязательно будет познавательным и заинтересует любителей химии и красивых химических опытов.

Начнем опыт с просмотра видеоролика

Итак, что нам понадобится:
— фталевый ангидрид;
— резорцин;
— металлический тигель;
— песчаная баня;
— газовая горелка;
— безводный хлорид цинка;
— соляная кислота.

Нагревание необходимо для того, чтобы смесь из фталевого ангидрида и резорцина расплавилась.

Весь флуоресцеин выковырян из металлического тигля, так что можно приступать к следующему шагу, а именно измельчению в мелкие ступки, чтобы разбить все крупные кристаллы.

После измельчения флуоресцеин необходимо вымыть от остатков хлорида цинка. Для этого высыпаем его в 10% соляную кислоту и нагреваем до кипения с перемешиванием.

Источник

Флуоресцеин Новартис — инструкция по применению

ИНСТРУКЦИЯ
по медицинскому применению препарата

Регистрационный номер: ЛСР-000829/08-180208

Торговое название: Флуоресцеин Новартис

Группировочное название: флуоресцеин натрия

Лекарственная форма: Раствор для внутривенного введения

Состав:
1 ампула содержит:
активное вещество: флуоресцеин натрия 500 мг (соответствует 0,442 г флуоресцеиновой кислоты);
вспомогательные вещества: натрия гидроксид, вода для инъекций.

Описание: Прозрачный темно-оранжевый раствор

Фармакотерапевтическая группа: диагностическое средство

Код ATX: S01JA01

Фармакологические свойства
Фармакодинамика
Раствор флуоресцеина натрия является диагностическим красителем. При стимуляции флуоресцеина синим светом (абсорбция от 465 нм до 490 нм), наблюдается желто-зеленая флуоресценция с длиной волны от 520 нм до 530 нм. Метод флуоресцентной ангиографии глазного дна позволяет диагностировать нарушения кровообращения сетчатки.

Фармакокинетика
Распределение
После внутривенного введения флуоресцеин натрия быстро распределяется в организме и достигает сосудов сетчатки через несколько секунд.

Связывание с белками плазмы крови
В плазме крови 50 — 84% препарата связывается с белками (особенно с альбумином) и около 15-17% — с эритроцитами.
После введения флуоресцеина натрия кожа пациента временно приобретает желтоватый оттенок, исчезающий через 6-12 часов.

Метаболизм
В организме препарат быстро метаболизируется до глюкуронида флуоресцеина, также обладающего флуоресцентными свойствами. Через 4-5 часов после введения препарат обнаруживается в плазме крови в основном в виде глюкуронида. Глюкуроновый метаболит в меньшей степени связывается с белками плазмы, чем флуоресцеин.

Выведение
Конечный период полувыведения флуоресцеина натрия и его глюкуронового метаболита из плазмы составляет приблизительно 23.5 и 264 мин, соответственно.
За 48 часов происходит почти полное (на 90%) выведение флуоресцеина натрия и его метаболитов с желчью и мочой. Препарат определяется в моче в течение 24-36 часов с постепенным снижением его концентрации. В течение 24-36 часов после введения флуоресцеина натрия отмечается ярко-желтое окрашивание мочи.
У пациентов с сахарным диабетом фармакокинетические параметры флуоресцеина натрия не изменяются.

Показания к применению

Флуоресцентная ангиография глазного дна и сосудистого русла радужки. Препарат предназначен только для диагностических целей.

Повышенная чувствительность к флуоресцеину натрия или любому другому компоненту препарата;

Интратекальное или внутриартериальное введение.
Клинические исследования по применению раствора Флуоресцеина Новартиса у детей и подростков младше 18 лет не проводились.

С осторожностью
Следует соблюдать осторожность при применении препарата у пациентов с аллергией или бронхиальной астмой в анамнезе.

При необходимости проведения флуоресцентной ангиографии (ФАГ) у больных с непереносимостью других ангиографических красителей или тяжелыми аллергическими реакциями в анамнезе, следует очень тщательно соотнести предполагаемую пользу от исследования и потенциальный риск развития тяжелой аллергии, с возможным летальным исходом (1 смертельный случай на 220 ООО ангиографических исследований по данным литературы).

Клинические исследования по применению раствора Флуоресцеина Новартиса у детей и подростков младше 18 лет не проводились.

Беременность и период лактации
Потенциальный риск для плода при проведении ФАГ у беременных женщин неизвестен. Препарат не следует применять при беременности, за исключением тех случаев, когда ожидаемая польза от исследования для матери превышает потенциальный риск для плода. Флуоресцеин натрия выделяется с грудным молоком. Следует отказаться от грудного вскармливания в течение 2-х дней после проведения ФАГ.

Способ применения и дозы
Взрослые
5 мл препарата (1 ампула) вводят внутривенно струйно.

Пациенты пожилого возраста
У пациентов пожилого возраста не требуется коррекции режима дозирования препарата.

Дети и подростки
Клинические исследования по применению раствора Флуоресцеина Новартиса у детей и подростков младше 18 лет не проводились. Данной категории больных препарат рекомендуется назначать из расчета, например -5 мг/кг.

Побочное действие
Наиболее частыми нежелательными реакциями при применении препарата являются тошнота и рвота.

Аллергические реакции: развитие гиперчувствительности, проявляющейся кожными реакциями (крапивница) и в редких случаях — анафилактическим/анафилактоидным шоком с возможным летальным исходом.

Со стороны ЦНС и периферической нервной системы: потеря сознания, судороги, расстройство мозгового кровообращения, головная боль, головокружение.

Со стороны сердечно-сосудистой системы: артериальная гипотензия, боли в груди, остановка сердца, острый инфаркт миокарда и тяжелый шок.

Со стороны дыхательной системы: диспноэ, отек гортани, бронхоспазм.

Со стороны пищеварительной системы: тошнота, рвота, запоры, диарея.

Дерматологические реакции: гиперемия, зуд, дерматит, временное желтоватое окрашивание кожи, сохраняющееся до 12 часов после введения флюоресцеина.

Читайте также:  Как приготовить шею барана

Со стороны мочеполовой системы: Возможно ярко желтое окрашивание мочи в течение 24-36 часов после введения флюоресцеина.

Со стороны организма в целом и реакции в месте введения: Озноб, приливы, тромбофлебит в месте инъекции, экстравазация раствора препарата, вызывающая сильную боль и возможным последующим развитием некроза тканей.
При попадании препарата под кожу возможно развитие подкожной гранулемы и токсического неврита локтевого нерва.

Передозировка
Данные о передозировке препарата отсутствуют.

Взаимодействие с другими лекарственными средствами
При применении флуоресцеина натрия у пациентов, получающих бета-адреноблокаторы, анафилактические/анафилактоидные реакции могут быть более выраженными.

ФАГ может влиять на результаты клинических анализов крови и мочи.

Несовместимость
Препарат нельзя смешивать с другими лекарственными средствами.
В растворах лекарственных средств с кислой рН (особенно антигистаминных препаратов) происходит осаждение флуоресцеина. Лекарственные средства с кислой рН не следует вводить одновременно с препаратом через общую систему для внутривенного введения.

Особые указания
Перед проведением ФАГ следует тщательно собрать полный медицинский анамнез, включая аллергологический; необходимо уточнить применение лекарственных препаратов (особенно бета-адреноблокаторов, включая глазные капли) и наличие в анамнезе сердечно-сосудистых заболеваний.

В редких случаях при проведении ФАГ у пациентов, получающих бета-адреноблокаторы, возможно развитие тяжелых анафилактических реакций с летальным исходом.

При необходимости проведения ФАГ у больных с установленным риском реакций гиперчувствительности, особенно получающих терапию бета-адреноблокаторами, включая глазные капли, диагностическую процедуру следует проводить в присутствии реаниматолога.

Для купирования реакций гиперчувствительности пациентам, получающим бета-адреноблокаторы, включая глазные капли, могут потребоваться более интенсивные реанимационные мероприятия в связи уменьшением эффективности эпинефрина и инфузионной терапии.

Перед введением препарата необходимо внимательно осмотреть ампулу. Раствор флуоресцеина натрия нельзя использовать при изменении цвета или появлении нерастворившихся видимых частиц. Препарат не следует смешивать с лекарственными средствами или разбавлять другими растворами в одном шприце. Для предотвращения реакций физической несовместимости следует промывать канюлю для внутривенного введения до и после введения препаратов.

Больной должен находиться под тщательным наблюдением врача как минимум в течение 30 мин после флуоресцентной ангиографии.

В помещении для проведения исследования следует заранее приготовить соответствующее реанимационное оборудование и лекарственные средства, необходимые для купирования реакций гиперчувствительности, например, эпинефрин, инфузионные растворы для восполнения ОЦК и кортикостероиды.

Для предупреждения развития кровоизлияний в окружающие ткани (экстравазации) следует соблюдать осторожность при введении флуоресцеина в вену; правильно установить иглу для внутривенного введения и контролировать поступление препарата. При экстравазации раствора флуоресцеина натрия, обладающего высоким значением рН, может развиваться тяжелое местное повреждение тканей.

Экстравазация в зоне инъекции препарата может вызывать сильную боль, тромбофлебит, воспаление с возможным некрозом. При выходе препарата из венозного русла необходимо немедленно прекратить его введение и принять соответствующие меры для лечения повреждения тканей и уменьшения боли.

Влияние на способность управлять автотранспортом и работать с механизмами
Данных об отрицательном влиянии препарата на способность управлять автомобилем или осуществлять работу с механизмами нет. Поскольку обычно для проведения ФАГ глазного дна необходимо также применение лекарственных средств, вызывающих расширение зрачка и циклоплегию, пациентов следует предупреждать о возможном отрицательном влиянии этих препаратов на способность управлять автомобилем и работать с механизмами.

Срок годности
2 года
Препарат не следует использовать после истечения срока годности.

Условия хранения
При температуре не выше 25°С.
Хранить в недоступном для детей месте.

Формы выпуска
Раствор для внутривенного введения 100 мг/мл, 5 мл в ампуле из бесцветного стекла; на ампулу нанесены кодировочные кольца и точка надлома. 10 ампул с инструкцией по применению в картонной пачке.

Условия отпуска из аптек
По рецепту.
Новартис Фарма АГ, Швейцария, произведено Новартис Фарма С.А.С., Франция / Novartis Pharma AG, Switzerland, manufactured by Novartis Pharma S.A.S., France

Адрес:
Лихтштрассе 35, 4056 Базель, Швейцария/Lichtstrasse 35, 4056 Basel, Switzerland

Дополнительную информацию о препарате можно получить по адресу:
115035, Москва, Садовническая ул., 82/2

Источник