Как приготовить раствор фюллеборна

Лабораторная диагностика аскаридоза

Аскаридоз — инвазия тонкого кишечника гельминтами Ascaris lumbricoides (аскаридами, круглыми червями длиною от нескольких миллиметров до 40 см), которые попадают в организм из заражённой почвы — в ней вызревают яйца червей. Аскаридами можно заразиться при употреблении плохо промытых овощей, ягод, зелени, загрязнённой еды, с грязных рук, игрушек, от человека к человеку.

Жизненный цикл гельминта включает несколько этапов:

проглоченные яйца попадают в кишечник, где из них развиваются личинки;

личинки с кровотоком попадают в лёгкие;

в лёгких личинки созревают, превращаясь в червей;

черви с кашлем попадают в горло, человек их глотает, аскариды снова попадают в кишечник;

в кишечнике взрослые особи спариваются и откладывают яйца, часть которых выводится вместе с калом, другая попадёт в лёгкие.

Аскаридами, по данным ВОЗ, заражено около 10 % населения планеты. Особенно остро проблема стоит в развивающихся странах и среди категорий населения с низкой санитарной культурой.

При малом и умеренном заражении инвазия проходит без симптомов. Осложнения, следовательно и симптомы, вызывают большие скопления червей в кишечнике.

Симптомы аскаридоза

Симптоматика заражения зависит от локализации паразитов:

в кишечнике — тошнота, рвота, дискомфорт в животе, диарея или чрезвычайно нерегулярный стул, кишечная блокада с сильной болью и рвотой, потеря аппетита, снижение веса, в кале — видимые черви, у детей — нарушение роста, развития;

в лёгких — кашель или рвота, одышка, иногда — аспирационная пневмония, кровь в выкашливаемой слизи, боль и дискомфорт в груди, лихорадка.

Неотложной медицинской помощи требуют кишечная блокада (масса глистов блокирует просвет кишечника, вызывая непроходимость), блокировка проходов к поджелудочной железе, печени. Такие осложнения могут привести к летальному исходу.

При масштабной инвазии могут развиваться аскаридозный аппендицит, аскаридоз поджелудочной (острый панкреатит), желчных путей и печени

Методы диагностики

Диагноз обычно ставят, исследуя кал на наличие паразитов. Дополнительно могут быть проведены тесты визуализации — рентген, КТ, МРТ-сканирование, эндоскопия. Они показывают, где находятся основные скопления червей, сколько червей созрело, какова вероятность возникновения осложнений.

Анализ крови

По крови определяют наличие антител к аскаридам. Тест назначают при обнаружении симптомов заболевания, используют обычно как вспомогательный (в комплексе с другими), подтверждающий глистную инвазию.

Тест обнаруживает/не обнаруживает anti-Ascaris lumbricoides в крови. Результаты теста могут быть следующими:

· ≤0,85 — отрицательный результат;

· 0,86—1,00 — пограничный результат (серая зона);

· >1,00 — положительный результат.

Важно! Антитела довольно длительное время определяются и после выздоровления, что приводит к ложноположительным результатам. На ранней стадии заболевания, при слабой выработке антител к аскаридам (индивидуальная особенность человека) тест показывает ложноотрицательные результаты.

Иммуноферментный анализ занимает ведущее место среди других серологических методов обнаружения аскарид. Он обладает высокой чувствительностью, простотой проведения. Особенно эффективен тест на ранней стадии инвазии (от 10 до 25 дней), когда выработка специфических антител происходит достаточно интенсивно. В более позднюю — кишечную — стадию иммуногенез снижается, количество антител в крови уменьшается до неопределяемого.

ИФА эффективен также при невысокой интенсивности заражения, в моменты миграции личинок и в том случае, когда в кишечнике человека преобладают самцы гельминтов. В этих ситуациях анализ кала на яйца аскарид (главный тест при заболевании) оказывается неинформативным, показывает ложноотрицательные результаты.

Анализ мокроты на аскариды

Анализ мокроты на гельминты имеет определённую информативную значимость в момент лёгочной (миграционной) стадии инвазии аскаридами, когда личинки находятся в лёгких человека. Однако его чувствительность составляет около 20 %. Потому тест мокроты на аскариды является исключительно вспомогательным, проводится в комплексе с другими исследованиями, а отрицательный результат не влияет на постановку окончательного диагноза.

Анализ кала

Микроскопическое исследование кала — главный и наиболее достоверный способ обнаружения яиц, личинок аскарид при условии инвазии. Следует учесть, что единственное исследование не может считаться достаточным для постановки диагноза. Цикл жизни гельминтов, особенности реакции организма приводят к множественным ложноотрицательным результатам, потому тест кала на гельминты нужно проводить несколько раз, с перерывом в несколько дней.

Самым простым способом исследования кала является метод нативного мазка. В нём обнаруживаются личинки, яйца всех видов червей, если они представлены в достаточном количестве. Но при нераспространённых инвазиях следы глистов в кале не всегда определяются, поэтому нативный мазок дополняется методами обогащения.

Метод Фюллеборна

Метод Фюллеборна основывается на способности яиц аскарид всплывать, когда биоматериал помещают в насыщенный раствор хлорида натрия с высокой относительной плотностью. Метод позволяет выявить яйца даже при малом их количестве.

Метод Фюллеборна эффективнее, чем нативный мазок, однако выполнять его немного сложнее. Достоинство метода и в том, что он доступен и стоит дёшево. Специалисты рекомендуют сочетать этот метод и нативный мазок для получения максимально достоверного результата.

Недостаток метода — в скрупулёзном исследовании поверхностной плёнки раствора и осадка, в длительности отстаивания: яйца аскарид всплывают примерно через 2 часа.

Метод Калантарян

Метод Калантарян также относится к методам обогащения, при этом — эффективнее и проще метода Фюллеборна. Для проведения теста по методу Калантарян используют раствор нитрата натрия, имеющий относительную плотность 1,38 (для теста по методу Фюллеборна — 1,18-1,22). В насыщенном растворе с такой плотностью всплывают яйца всех распространённых видов гельминтов, исследовать осадок не нужно.

Метод Красильникова

Метод Красильникова относится к методам седиментации. Исследование по этому методу состоит в освобождении яиц гельминтов от испражнений с помощью поверхностно-активных веществ, на основе которых производят моющие средства. Такой способ помогает обнаруживать яйца всех червей и в любом количестве в испражнениях.

Рентгенография, УЗИ

Рентгенография, ультразвуковое исследование при аскаридозе назначают для визуализации инвазии. С их помощью определяют локализацию червей, распространённость и степень поражения, изменения внутренних органов, связанные с гельминтозом (воспаления/образования поджелудочной, печени, желчного пузыря, лёгких, мозга).

С помощью УЗИ обычно исследуют изменения внутренних органов, а рентген с введением контрастной взвеси позволяет увидеть местонахождение червей, определить их количество, размеры.

Известны случаи, когда при явных признаках инвазии ни один лабораторный тест (исследование кала, крови) не подтверждал гельминтоз, однако рентгенография показала наличие больших взрослых аскарид в организме.

Антропометрические показатели

При аскаридной инвазии в детском возрасте снижаются все антропометрические показатели ребёнка в сравнении с нормальными для его возраста. Замедляется рост, не увеличивается (даже уменьшается) вес, может снизиться зрение, умственная активность. Отсутствие лечения усугубляет последствия инвазии и приводит к существенному отставанию в развитии.

При наличии описанных выше симптомов проводится комплексное обследование на наличие аскарид (других червей) в организме.

Группы риска и профилактика

В группе риска по аскаридозу — дети, работники теплиц (парниковых хозяйств), цветоводы, активные дачники, работники канализационных сетей, семьи с низким уровнем санитарной культуры.

Чтобы избежать заражения аскаридами, нужно:

тщательно промывать под проточной водой фрукты, овощи, лучше — с моющим средством (например — хозяйственным мылом);

тщательно мыть руки после контакта с землёй или предметами, на которых могла быть почва (даже в микродозах);

не использовать в качестве удобрений человеческие испражнения.

Однако даже при соблюдении всех правил личной гигиены исключить заражение полностью невозможно. Потому одна из мер профилактики — периодическое исследование на инвазию.

Стоимость тестов на аскаридоз в АО «СЗДЦМ»

Во всех подразделениях АО «СЗЦДМ» вы сможете пройти комплекс исследований на инвазию аскаридами.

Где сдать анализы на аскаридоз

Анализы на инвазию аскаридами вы можете сдать в любом медицинском центре или лабораторном терминале АО «СЗЦДМ».

А так же можно вызвать на дом или в офис выездную службу (так же как в медцентре или лабораторном терминале), все скидки при этом сохранятся!

Лаборатория АО «СЗЦДМ» предлагает услуги, обеспечивающие комплексное и преемственное лабораторное обследование пациента

Диагностика В медицинских центрах АО «СЗЦДМ» проводят качественные диагностические исследования всего организма

Лечение Наши медицинские центры ориентированы на обслуживание пациентов в амбулаторном режиме и объединены единым подходом к обследованию и лечению пациентов.

Реабилитация Реабилитация — это действия, направленные на всестороннюю помощь больному человеку или инвалиду для достижения им максимально возможной полноценности, в том числе и социальной или экономической.

Профосмотры АО «СЗЦДМ» проводит профилактические осмотры работников, которые включают в себя — комплексы лечебных и профилактических мероприятий, проводимых для выявления отклонений в состоянии здоровья, профилактики развития и распространения заболеваний.

Источник

Метод Фюллеборна — всплывания (флотации)

Качественные методы гельминтоовоскопии

Просмотр препаратов (исследование) производят при малом увеличении микроскопа: объектив Х8 – Х10, окуляр Х7-Х10. Только в сомнительных случаях используют объектив — Х40. При просмотре яиц с прозрачной оболочкой необходимо затемнить поле зрения микроскопа.

Метод нативного мазка

1. Крупинку фекалий (30-40 мг) растереть на предметном стекле в капле 50% раствора глицерина (можно в воде или в физиологическом растворе) до равномерной взвеси.

2. Покрыть покровным стеклом.

На одном предметном стекле готовят две капли взвеси фекалий на расстоянии 3-4 см друг от друга, используя разные палочки для фекалий.

Этот метод мало эффективен, особенно при слабой инвазии. Метод используют как дополнительный к другим методам.

Метод толстого мазка (метод Като и Миура)

1. Квадратные пластинки целлофана (22х30 мм)выдержать в феноле, затем в смеси дистиллированной воды (100 мл) + глицерин (100 мл) + 3% малахит зеленый (1 мл)24 часа. ГЛИЦЕРИН ОБЕЗВОЖИВАЕТ ПЛАСТИНКУ ЦЕЛЛОФАНА, ФЕНОЛ ОБЕЗЖИРИВАЕТ, просветляет препарат. МАЛАХИТ ОКРАШИВАЕТ В ЗЕЛЕНЫЙ ЦВЕТ, что улучшает их наблюдение в нативном препарате.

2. Крупинку фекалий (100 мг) намазать на стеклянную пластинку (25х35 мм)- препарат мутный, яйца трудно различать, т.к. они окрашены пигментом фекалий в желто-коричневый цвет.

3. Накрыть влажной целлофановой пластинкой (препарат обезвоживается, обезжиривается и просветляется, яйца окрашиваются в зеленоватый цвет. Препарат легче изучать).

4. С помощью предметного стекла притереть целлофан.

5. Препарат выдержать в течение часа при комнатной температуре.

6. Затем выдержать 30 минут в сушильном шкафу при 40 0 С.

С помощью этого метода можно исследовать большой объём фекалий в препарате. Наиболее точный метод.

Не используется при исследовании яиц карликового цепня и анкилостом т.к. они быстро разрушаются.

3. Метод Телемана – осаждения.Основан на разности плотности яиц и раствора. Используется раствор меньшей плотности, чем яйца гельминтов (яйца тяжелее). Растворы эфиро-формалиновые, эфиро-уксусные.

1. Фекалии (1,5 г) смешать в стакане с 50% раствором соляной кислоты (5 мл) или с 10% раствором едкого натра – NaOH. Смесь пропустить через металлически фильтр.

2. Затем смесь перелить в пробирку с эфиром (5 мл).

3. Закрыть пробкой, встряхнуть до равномерной взвеси.

В результате в пробирке образуется три слоя взвеси.

4. Два верхних слоя слить.

5. К осадку добавить воду, встряхнуть.

7. Исследовать 2 капли осадка при увеличении микроскопа 7Х10.

С помощью этого метода можно исследовать яйца всех гельминтов.

Метод Фюллеборна — всплывания (флотации)

Этот метод основан на свойстве яиц гельминтов — всплывать в насыщенных солевых растворах (350 г поваренной соли + 1литр кипяченой воды = фильтровать через марлю). Используется раствор имеющий плотность большую, чем яйца гельминтов(яйца легче).

1. Одну часть фекалий смешать с 20-ю частями насыщенного раствора хлорида натрия (NaCl).

Удельный вес раствора составляет 1,18. Раствор добавлять постепенно.

2. Удалить крупные частицы фекалий.

3. Смесь оставить отстаиваться 40-60 минут.

Яйца гельминтов, имеющих меньший удельный вес, чем раствор всплывут на поверхность.

4. С поверхности проволочной петлей (диаметр – 1 см) снять несколько капель и перенести на предметное стекло.

5. Покрыть покровным стеклом и исследовать.

С помощью этого метода нельзя обнаружить яйца Trematoda и неоплодотворенные яйца Ascaris. Яйца этих гельминтов и яйца Trichuris trichiura можно обнаружить в осадке.

5. Метод Калантарян (видоизменённый метод флотации — всплывания)

Этот метод основан на свойстве яиц гельминтов всплывать в насыщенных растворах (NaNO₃ + вода ). Удельный вес раствора – 1,4, выше чем имеет раствор поваренной соли.

1. Одну часть фекалий смешать с 20-ю частями раствора.

Через 10-15 минут яйца всплывут на поверхность.

3.С поверхности смеси снять проволочной петлей (диаметр – 1 см) несколько капель и перенести на предметное стекло.

4. Покрыть покровным стеклом и исследовать.

Исследование осадка при этом методе не требуется (яйца Trematoda всплывают).

Можно использовать калиевую соль, аммиачную селитру, смесь солей.

Метод Красильникова

1. Фекалии (2,5г) размешать в 1% — 1,5% растворе детергента (20-30 мл).

Детергент (моющее или чистящее средство) – «Лотос», «Экстра» и т.д.

2. Отстаивать в течение суток или центрифугировать 1 мин. При 1000 оборотах/ мин.

В результате образуется 3 слоя взвеси. Яйца концентрируются над нижним слоем.

3. Приготовить 2-3 препарата после центрифугирования или взять пипеткой с поверхности нижнего слоя.

Источник