Как приготовить смесь никифорова

Информация, представленная на данном сайте, предназначена исключительно для образовательных и научных целей ,
не должна использоваться для самостоятельной диагностики и лечения, и не может служить заменой очной консультации врача.
Администрация сайта не несёт ответственности за результаты, полученные в ходе самолечения с использованием справочного материала сайта
Перепечатка материалов сайта разрешается при условии размещения активной ссылки на оригинальный материал.
© 2008 blizzard. Все права защищены и охраняются законом.

Источник

Как приготовить смесь никифорова

Мазки крови готовят на предметных стеклах, которые предварительно моют и обезжиривают.

Подготовка стекол

Реактивы.

1. Хозяйственное мыло — 2 % раствор или раствор стирального порошка: 20 г растворить в 975 мл воды и добавить 20 мл пергидроля.
2. Смесь Никифорова:равные части этилового спирта 96 % и диэтилового эфира.

Специальное оборудование не требуется.

Ход обработки стекол

Стекла (новые и бывшие в употреблении) помещают в эмалированную посуду в 2 % раствор хозяйственного мыла или стирального порошка на 8—10 ч. Кипятят в указанном растворе 5—10 мин, старые мазки предварительно стирают ветошью или ватным тампоном. Более длительное кипячение или использование алюминиевой посуды не рекомендуют, так как стекла мутнеют. Промывают в проточной воде. Насухо вытирают и помещают в смесь Никифорова на 30—60 мин. Насухо вытирают чистым полотенцем и хранят в широкогорлой чистой посуде с притертой пробкой. Чистые стекла рекомендуется брать либо пинцетом, либо за края (соприкосновение пальцев с поверхностью стекла оставляет жирные следы).

Техника приготовления мазков

На сухое подготовленное описанным выше способом предметное стекло наносят мазок крови следующим образом. На стекло ближе к короткой стороне наносят стеклянной палочкой (или непосредственно из места укола пальца) небольшую каплю крови. Оставляют стекло в горизонтальном положении и размазывают каплю крови по стеклу с помощью чистого шлифованного стекла, помещая его под углом 45°; коротким ребром, подождав, пока вся кровь расплывется по нему, быстро проводят по предметному стеклу. Не следует сильно нажимать на стекло, так как при этом травмируются форменные элементы крови.

Мазки высушивают на воздухе и маркируют (лучше простым карандашом). Высохший мазок должен быть равномерно тонким, желтоватого цвета, достаточной величины (располагаться на 1—1,5 см от краев, занимать почти всю длину стекла) и оканчиваться «метелочкой». Толстые (густо-розового цвета) мазки не следует использовать, так как в них морфология клеток плохо различима.

Более качественные мазки крови получаются при использовании автоматических устройств: «Hemaprep» фирмы «Opton» (ФРГ), «Slide Spinner» фирмы «Corning Scientific Instruments» (США) и др., предназначенных для приготовления мазков. Благодаря такому устройству мазки получаются равномерные и имеют стандартные размер и толщину.

Фиксация и окраска мазков унифицированным методом (1979).

В качестве унифицированных приняты методы окраски по Нохту и Паппенгейму.

Реактивы для фиксации: метиловый спирт х. ч. или раствор эозинметиленового синего по Маю — Грюнвальду.

Реактивы для окраски мазков по Нохту.

Реактивы для окраски мазков по Паппенгейму.

1. Раствор эозин-метиле-нового синего по Маю — Грюнвальду. При отсутствии готового раствора красителя его можно приготовить, растворив 1 г сухого красителя в 1000 мл метилового спирта. Раствор готов к употреблению через 4 дня.

2. Рабочий раствор азур-эозина по Нохту.

Специальное оборудование

Кювета для фиксации и окраски мазков со штативом-контейнером (при отсутствии используют эмалированные лотки с установленными для стекол «рельсами» из пары стеклянных палочек, соединенных резиновыми трубками).

Фиксация мазков

Фиксатор мазков наливают либо в кювету, либо в широкогорлую посуду с притертой пробкой. Высушенные на воздухе мазки помещают в контейнер, который опускают в кювету с фиксатором (или кладут по одному в посуду) на 5—10 мин. Вынимают контейнер со стеклами из кюветы (или вынимают пинцетом стекла и устанавливают в штативе), оставляют на воздухе до полного высыхания.

Окраска по Нохту

Высохшие фиксированные мазки, не вынимая из контейнера, помещают в кювету с рабочим раствором краски на строго определенное время, подобранное для каждой партии красителя (от 20 до 45 мин). При отсутствии кюветы с контейнером стекла помещают горизонтально на «рельсы» (мазком кверху) и наливают высокий слой (3—4 мл на мазок) рабочего раствора краски. Вынимают контейнер со стеклами из кюветы с красителем и помещают его в кювету с водопроводной водой (при отсутствии кюветы краску со стекол смывают, не снимая их с «рельсов», водопроводной водой). Высушивают мазки на воздухе.

Окраска по Паппенгейму

Сухие нефиксированные мазки помещают в кювету с раствором Мая—Грюнвальда на 3—5 мин (или наливают на мазок, помещенный на «рельсы» высоким слоем). Контейнер с мазками ополаскивают в кювете с дистиллированной водой (или на мазок, помещенный на «рельсы», не сливая краситель, добавляют дистиллированную воду на 1 мин). Помещают контейнер с мазками в кювету с азур-эозиновой краской по Нохту (или наливают на мазок краску) на 8—15 мин. Смывают краску водопроводной водой.

Мазки высушивают на воздухе.

Окраска по Романовскому — Гимзе

Производится так же, как и по Нохту; в качестве красителя используют готовый раствор Романовского—Гимзы, который перед употреблением разводят из расчета 1 капля краски на 1 мл дистиллированной воды. Время окраски устанавливают опытным путем для каждой новой партии красителя (25—40 мин).

Автоматическая окраска мазков

Осуществляется с помощью специальных устройств: «Hematek» фирмы «Ames» (США), WL-600 фирмы «Veb Kombinat Medizin und Labortechnik» (ГДР) и др., в которые ручным способом загружают нефиксированные мазки. Последующее автоматическое дозирование красителей и буферных растворов обеспечивает стандартную и равномерную окраску мазков.

Источник

Никифорова смесь

1. Малая медицинская энциклопедия. — М.: Медицинская энциклопедия. 1991—96 гг. 2. Первая медицинская помощь. — М.: Большая Российская Энциклопедия. 1994 г. 3. Энциклопедический словарь медицинских терминов. — М.: Советская энциклопедия. — 1982—1984 гг .

Смотреть что такое «Никифорова смесь» в других словарях:

Никифорова смесь — (М. Н. Никифоров) смесь равных объемов этилового спирта и безводного серного эфира; применяется для фиксации препаратов крови, бактериальных препаратов и отпечатков органов … Большой медицинский словарь

Метод Грама — Грамположительная Bacillus anthracis (фиолетовые палочки) в образце cпинномозговой жидкости. (Другие клетки лейкоциты) … Википедия

Грама метод — Метод Грама метод окраски микроорганизмов для исследования, позволяющий дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам их клеточной стенки. Предложен в 1884 году датским врачом Г. К. Грамом. По Граму бактерии окрашивают основными… … Википедия

Грамм-положительные бактерии — Метод Грама метод окраски микроорганизмов для исследования, позволяющий дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам их клеточной стенки. Предложен в 1884 году датским врачом Г. К. Грамом. По Граму бактерии окрашивают основными… … Википедия

Окраска по Граму — Метод Грама метод окраски микроорганизмов для исследования, позволяющий дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам их клеточной стенки. Предложен в 1884 году датским врачом Г. К. Грамом. По Граму бактерии окрашивают основными… … Википедия

Окрашивание по Граму — Метод Грама метод окраски микроорганизмов для исследования, позволяющий дифференцировать бактерии по биохимическим свойствам их клеточной стенки. Предложен в 1884 году датским врачом Г. К. Грамом. По Граму бактерии окрашивают основными… … Википедия

Репертуар Московского Малого театра XIX века — Основная статья: Репертуар Московского Малого театра Здесь представлен список постановок Московского академического Малого театра России за XIX век[1][2][3][4][5][6][7][8] … Википедия

ФИКСАЦИЯ — в гистологии является первым и весьма важным моментом в процессе приготовления гист. препаратов. Зафиксировать ткань это значит подготовить ее к дальнейшим методам обработки. В результате Ф. происходят довольно сложные изменения различных… … Большая медицинская энциклопедия

ОКРАСКА — (микроорганизмов). Мазок на предметном или покровном стекле высушивается на воздухе; высушивание над пламенем не рекомендуется, допускается лишь помещение препарата вблизи пламени. Высушенный препарат фиксируется троекратным проведением через… … Большая медицинская энциклопедия

Медицина — I Медицина Медицина система научных знаний и практической деятельности, целями которой являются укрепление и сохранение здоровья, продление жизни людей, предупреждение и лечение болезней человека. Для выполнения этих задач М. изучает строение и… … Медицинская энциклопедия

Список выпусков телепередачи «Большая разница» — Содержание 1 Первый сезон 2 Второй сезон 3 Третий сезон … Википедия

Источник

Как приготовить смесь никифорова

Раствор Люголя . Йодсодержащий раствор. Является одним из основных компонентов некоторых сложных окрасок (по Граму, по Нейссеру). Также применяется как самостоятельный краситель (при окраске грибов). Раствор Люголя для микробиологических целей значительно отличается по составу от аптечного раствора для медицинских целей.

Краска Мансона. Раствор на основе метиленового синего и тетрабората натрия. Применяется как самостоятельный неспецифический краситель; в качестве компонента при сложных окрасках (по Муромцеву для выявления вирусных включений); как улучшитель краски Азур-эозин по Романовскому.

Метиленовый синий Леффлера. ⁠Является составным компонентом сложных окрасок (по Михину, по Кауфману, по Пешкову и др.). Может использоваться как⁠ самостоятельный⁠ неспецифический краситель для окраски бактерий, грибов и др.

Набор для окраски по Граму. Используется для окраски бактерий с целью дифференциации на грамположительные (сине-фиолетовая окраска) и грамотрицательные (красная окраска). ⁠ Является одним из основных методов в практической медицинской микробиологии. Окраска в несколько этапов. Дополнительно необходим этиловый спирт, которым набор не комплектуется.

Набор для окраски по Цилю-Нильсену. Используется для окраски бактерий с целью выявления кислотоустойчивых бактерий (микобактерий, в т.ч. микобактерий туберкулеза и лепры). ⁠ Является одним из основных методов в практической медицинской микробиологии. ⁠ Окраска в несколько этапов.

Краска универсальная по Муромцеву. Трехсоставная краска, основу которой составляют фуксин основной и метиленовый синий. Используется для одноэтапной окраски бактерий, при которой в определенной степени можно выявить капсулы, споры, биполярность бактерий. ⁠

Краситель Ребигера. Краситель на основе генцианового фиолетового и формалина с возможностью окраски одновременно с химической фиксацией препарата. Окраска одноэтапная, служит в основном для выявления капсул бактерий. Может использоваться для неспецифической простой окраски.

⁠ Набор для окраски по Граму в модификации по Синеву. Модификация подразумевает использование вместо растворов красителей кусочков фильтровальной бумаги, пропитанных красителями и высушенных. Окраска препаратов проводится на предметном стекле через фильтровальную бумагу каплей обычной воды, которая вымывает краситель на препарат.

Генциановый фиолетовый карболовый. ⁠ Является составным компонентом сложных окрасок (по Граму). Может использоваться как⁠ самостоятельный⁠ неспецифический краситель.

Фуксин основной карболовый. Он же фуксин Циля. ⁠ Является составным компонентом сложных окрасок (по Граму). Может использоваться как⁠ самостоятельный⁠ неспецифический краситель. При использовании в окраске по Граму непосредственно перед применением разводится водой в отношении 1:9. Получается фуксин Пфейфера.

Набор для окраски по Пешкову. Двухкомпонентный набор. ⁠ Используется для окраски бактерий и их спор. ⁠ Окраска двухэтапная.

⁠ Набор для окраски по Шефферу-Фултону. ⁠⁠ Двухкомпонентный набор. Используется для окраски бактерий и их спор. ⁠ Окраска двухэтапная.

Реактив Като. Краска на основе малахитовой зелени для выяления яиц гельминтов (преимущественно в фекалиях). Реакция идет непосредственно на предметном стекле. Параллельно окраске яиц происходит обесцвечивание сопутствующего фонового материала, что в разы повышает контрастность препарата. ⁠ Окраска одноэтапная. Является одним из основных методов в практической медицинской паразитологии.

Лизирующий раствор №1. Четырехкомпонентный раствор, применяемый для глубокого расщепления органики (животных, растительных и микробных клеток). Применяется в основном в молекулярно-генетических методах для экстракции ДНК из клеток. ⁠ Токсичен при попадании внутрь и на кожу.

⁠ Лизирующий раствор №2. Двухкомпонентный раствор, применяемый для расщепления преимущественно белковой органики (животных, растительных и микробных клеток). Применяется в основном в молекулярно-генетических методах для удаления белковых фракций при экстракции ДНК из клеток. ⁠ Токсичен при попадании внутрь и на кожу.

Раствор щелочи для подготовки материала. Раствор гидроксида калия (или гидроксида натрия). Используется для размягчения и расщепления материала (ногти, соскобы эпителиальных клеток кожи, волосы) для дальнейшего исследования на пораженность грибками. Является раствором для пробоподготовки, после которой целесообразно провести окраску грибов.

Формалин. Применяется для химической фиксации материала в гистологии, микробиологии и др. Часто используется в качестве консерванта различных видов биологического материала. В качестве 10% раствора применяется без предварительного разведения.

Краситель Раскиной. Краситель на основе фуксина Циля и метиленового синего. Применяется для вывления в бактериях зерен волютина ⁠в бактериях (например, в бактериях дифтерии), что является идентифицирующим признаком. Окраска одноэтапная.

Набор для витальной (прижизненной) окраски простейших. Включает растворы двух разных красителей. Суть витальной окраски заключается в воздействии на простейших растворами красителей в очень малых концентрациях, которые не вызывают гибель клеток, но позволяют контрастировать простейших на окружающем фоне. Окраска одноэтапная, проводится в жидкой среде.

⁠ Набор для витальной (прижизненной) окраски бактерий. Включает растворы двух разных красителей. Суть витальной окраски заключается в воздействии на бактерий растворами красителей в малых концентрациях, которые не вызывают гибель клеток, но позволяют контрастировать бактерий на окружающем фоне. Окраска одноэтапная, проводится в жидкой среде.

Набор реагентов для обработки предметных стекол по Цеттнову. Включает растворы серной кислоты, слабый раствор щелочи, бихромат калия (сухой). Кислота и бихромат калия перед применением смешиваются, что дает темный раствор оксида хрома, в котором и идет обработка стекол, с дальнейшим промыванием и нейтрализацией остатков щелочью. Такая обработка позволяет очень эффективно очищать и обезжиривать предметные стекла.

Смесь Никифорова. Смесь этилового спирта и диэтилового эфира. Является химическим фиксатором материала. Помимо этого, применяется в качестве обезжиривающего раствора для обработки стекол. Смесь очень летучая, пахучая и легко воспламеняемая. ⁠ Работы производить при включенной вытяжке и строго при потушенных горелках.

Жидкость Карнуа. ⁠ Смесь этилового спирта, хлороформа и ледяной уксусной кислоты. Является химическим фиксатором материала. Смесь летучая и пахучая. Работы производить при включенной вытяжке.

Глицерин. Применяется в качестве компонента многих сложных красителей, а также в качестве самостоятельного реагента для просветления материала при паразитологических исследованиях. Квалификация чистоты — ХЧ (химически чистый) или ЧДА (чистый для анализа).

Азур-эозин по Романовскому в растворе. Раствор азура, эозина и метиленового синего в метиловом спирте. Универсальный краситель, применяемый в микробиологии, цитологии, паразитологии и др. Используется для окраски мазков крови, бактерий, простейших. Широко используется для окраски микробов, плохо поддающихся классическим окраскам (спирохеты, риккетсии, хламидии и др.). Как правило, перед использованием краситель разводится водой примерно в 10-20 раз. Предъявляются высокие требования к качеству воды для разведения (дистиллированная вода нейтральной реакции). Особенно это требование актуально при окраске форменных элементов крови и паразитических простейших, при окраске бактерий это имеет меньшее значение.

Набор для обогащения для гельминтологических исследований. Комплектуется растворами для флотации и седиментации (два метода обогащения с разными принципами действия). Используется для концентрирования яиц гельминтов (преимущественно из фекалий, иногда из почвы). Так как исследование нативного материала считается низкоэффективным, методы обогащения позволяют в разы повысить обнаруживаемость яиц гельминтов. Флотационный раствор высокой плотности концентрирует яйца в пленке (метод Калантарян), седиментационный раствор низкой плотности концентрирует яйца в осадке (метод Красильникова).

Консерванты. ⁠ Многокомпонентные растворы для сохранения (консервации) материала. Консервирующие растворы бывают длительной (до года и более) и среднедлительной консервации (несколько месяцев).

Консервант Шеляпиной. Многокомпонентный раствор для сохранения (консервации) материала с целью сохранения яиц гельминтов до исследования. Обеспечивает длительное сохранение яиц гельминтов (несколько месяцев).

Консервант Барбагалло. ⁠ Многокомпонентный раствор для сохранения (консервации) материала с целью сохранения яиц гельминтов, а также самих гельминтов. Обеспечивает длительное сохранение гельминтов (особенно нематод) и их яиц (несколько месяцев).

Консервант Турдыева. ⁠ Многокомпонентный раствор для сохранения (консервации) материала с целью сохранения вегетативных форм простейших и их цист до исследования. Может использоваться для консервации яиц гельминтов. Раствор длительной консервации (до 1 года и более).

⁠К онсервант Сафаралиева. ⁠ ⁠ Многокомпонентный раствор для сохранения (консервации) материала с целью сохранения вегетативных форм простейших и их цист до исследования. Раствор длительной консервации (до 1 года и более).

⁠ К онсервант Барроу. ⁠ ⁠ Многокомпонентный раствор для сохранения (консервации) материала с целью сохранения вегетативных форм простейших и их цист до исследования. Раствор среднедлительной консервации (до 2 месяцев и более). Сосотоит из консервирующего и красящего раствора. Красящий раствор применяется непосредственно перед исследованием.

Клей для исследования на энтеробиоз по Рабиновичу. Многокомпонентный раствор, используемый для нанесения на стеклянные палочки или предметные стекла. При погружении в раствор палочек или нанесении его на стекло после кратковременной сушки на воздухе из раствора быстро испаряется эфир, оставляя на стекле клеевую основу, на которую делаются отпечатки на яйца остриц и микроскопируются. Раствор горюч. Является одним из классических методов в паразитологии.

Раствор сафранина водный. Является составным компонентом сложных окрасок (по Граму, по Ольту, по Шефферу-Фултону и др.). Может использоваться как⁠ самостоятельный⁠ неспецифический краситель.

⁠ Раствор малахитового зеленого водный. Является составным компонентом сложных окрасок. Может использоваться как⁠ самостоятельный⁠ неспецифический краситель.

⁠ Раствор хризоидина водный. Является составным компонентом сложных окрасок. Может использоваться как⁠ самостоятельный⁠ неспецифический краситель.

Набор красящих бумажек «Метиленовый голубой», «Малахитовый зеленый», «Сафранин О», «Генциановый фиолетовый», «Фуксин основной». Сухая фильтровальная бумага, пропитанная красителем и нарезанная квадратами (размером примерно со стандартное покровное стекло). Используется как более удобная форма красителя. ⁠Окраска препаратов проводится на предметном стекле через фильтровальную бумагу каплей обычной воды, которая вымывает краситель на препарат.

Набор красящих бумажек для окраски спор бактерий по Виртцу в модификации Саватеева. ⁠Двухкомпонентный набор (⁠сухая фильтровальная бумага, пропитанная сафранином О и малахитовым зеленым, и нарезанная квадратами). ⁠Используется для окраски бактерий и их спор. ⁠Окраска двухэтапная. ⁠Окраска препаратов проводится на предметном стекле через фильтровальную бумагу каплей обычной воды, которая вымывает краситель на препарат.

Полистироловая среда для заключения препаратов. Синтетическая среда на основе полистирола для приготовления постоянных препаратов. Используется для заключения обезвоженных и промытых в ксилоле (толуоле) препаратов (мазков, срезов, макропрепаратов). Время схватывания — 20-40 мин, время полного застывания — от нескольких часов до суток.

Источник