Забуференный формалин как приготовить

Для фиксации пригоден формальдегид не менее 37%. В емкости с основым раствором не желателен осадок. Для того, чтобы он не образовался, храните его при комнатной температуре со всем предосторожностями. Если осадок все же образовался, то его обязательно нужно хорошо взболтать перед разбавлением.

Забуферивание — это относительно простая операция: берется 9 л дистиллированной воды, 1 л формалина (я на своих пластиковых канистрах сделал отметки на уровне 9л для воды, а формалин — обычная литровая банка) и пара солей в определнных количествах.
Смысл забуферивания состоит в том, чтобы удержать рН раствора на определенном уровне. Для этого берется пара солей, в нашем случае одно- и двухзамещенных фосафтов натрия (можно и калия, но для этого нужен соответствующимй пересчет).
Эти фосфаты, как и многие другие содержат то или иное количество кристаллизационной воды в молекуле, что зачастую недооценивается ни лаборантами ни теми, кто закупает реактивы. Во всех учебниках по микроскопической технике цитируется только одна пара солей NaH2PO4 · Н2О — 4г и Na2HPO4 (б/в) 6.5г. Если брать другие фосфаты (например двухводные или двенадцативодные) в этих соотношениях, то эффекта забуферивания не наблюдается, поскольку отличается молекулярная масса этих солей из-за дополнительных молекул воды, в то время как количество анионов HPO4- и Н2РО4- и катионов Na+ будет таким же.
Как правило, на рынке обычно доступны только 6 фосфатов. В приложенном файле вы без труда сможете найти сколько и каких солей нужно взять для забуферивания формалина. Эти пересчеты сделаны на литр раствора. Для 10 литров нужно брать всего в 10 раз больше. (Я у себя в лаборатории распечатал и повесил на стену эти слайды).
Не забывайте читать этикетки с солями, закупоривать соли после взвешивания и проверять рН готового растовра хотя бы тест-полосками.
Никогда не используйте повторно однажды использованный фиксатор. Он стоит не настолько дорого, чтобы заниматься рециклизацией. Если лень возиться с приготовлением, купите готовый забуференный раствор. И попытайтесь договориться с администрацией и килиницистами, чтобы Вы сами делали для них формалин. Это дает громадные преимущества.
Надеюсь, на вопрос ответил.

Источник

Формалин гистологический 10% нейтральный забуференный Блик» по ТУ 9398-005-89243190-12, 1 л. голубой

Кат. № НФ-00000013

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Вид упаковки: флакон

Нейтральный раствор 10 % формалинового фиксатора, забуференного фосфатами, для фиксации биологических препаратов. Многоцелевой универсальный фиксатор дли гистологии, гистохимии, уточняющих молекулярных тестов (FISH, CISH), гибридизации in situ. Имеет улучшенные физико-химические свойства, которые позволяют при фиксации препаратов сохранить их морфологию клеток и тканей. Лишен резкого запаха формальдегида, дезодорирован специальной парфюмерной композицией. Имеет цветовую метку: голубая – для операционного материала (общих гистологических образцов), розовая (красный) – для биопсийного и эндоскопического. Форма выпуска: во флаконах объемом 1 литр или канистрах по 5 и 10 литров

Функциональное назначение

Обеспечение качественного результата работы с хирургическим и аутопсийным материалом в ручных методиках, карусельном и вакуумном процессорах. Перед проводкой кассеты с тканями необходимо промыть в проточной воде в течение 15-20 минут для удаления избытка формалина.
Желательно использовать пластиковую, не стеклянную посуду. Толщина объектов — 2-3 мм. Соотношение объемов реактив/ткань – 20:1. Проникновение формалина в ткани составляет 1 мм в час, но время, когда возникают сшивки белковых молекул, неизменно и составляет около 24 часов, поэтому время фиксации сокращать нельзя. В отличии от технологии высокочастотного воздействия на ткань для сокращения времени фиксации, не приводит к фиксации методом коагуляции белков, и сохраняет материал пригодным для иммуногистохимического исследования.
Время фиксации: 24-48 часов при комнатной температуре. Для образцов любого типа, включая эндоскопические допускается фиксация 16-18 часов при температуре 37-40°С (в процессоре или термостате).
Результат фиксации: зафиксированные кусочки ткани должны быть серо-коричневого цвета (при использовании розового формалина для малых биоптатов — образцы имеют красный цвет) и одинаковую равномерную плотность.

Формалин розового цвета предназначен для малых биоптатов (до 1 мм в диаметре), эндоскопических образцов, помогает правильно ориентировать объект во время заливки, делает заметным при микротомии, упрощает работу патологоанатома. Голубой формалин предназначен для фиксации образцов рутинной гистологии, гистохимии, иммуногистохимии и гибридизации, дофиксации операционного и биопсийного материала. Цветовая метка, кроме того, отличает данный раствор от множества других имеющихся в операционных растворов для дезинфекции, ПХО и т.п., упрощает работу персонала

Технические характеристики

Реагент сложный диагностический, содержащий 10% формалин нейтральный забуференный, готов к применению.
Внешний вид: прозрачная жидкость бледно-голубого (или красного) цвета со слабым характерным запахом формалина.
Параметр растворимости (δ) – 48 Мпа, плотность (ρ) – 1 г/куб.см.
Уровень рН в диапазоне: 7.0 — 7.4.
Используется для фиксации тканей в рутинной гистологии, гистохимии, иммуногистохимии и гибридизации in situ.
Упаковка – емкость из светопроницаемого пластика для простого визуального определения цвета и уровня пирисутствия содержимого.
Срок годности — 3 года, указан на этикетке.
Наличие регистрационного удостоверения на медицинское изделие РФ

Источник

Формалин Гистологический

ФОРМАЛИН ГИСТОЛОГИЧЕСКИЙ

«Гистологический формалин 10 % забуференный нейтральный по ТУ 9398-001-27487504-2016 (гистологический формалин 10 % ) предназначен для использования в качестве фиксатора в процессе проводки биологических тканей или клинических образцов.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРОДУКТА

Условия применения: клинико-диагностические и патологоанатомические лаборатории медицинских учреждений, а также лаборатории научно-исследовательских институтов.

Противопоказания к применению: не выявлены при использовании в соответствии с эксплуатационной документацией.

ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗДЕЛИЯ

СОСТАВ: Гистологический формалин 10 % представляет собой 10% раствор технического формалина, марки ФМ — водного раствора формальдегида (СН2О), содержащего обычно, кроме того, по условиям производства метиловый спирт.

ФОРМА ВЫПУСКА: Гистологический формалин 10 % выпускается во флаконах 10 мл, 50 мл, 1 л и канистрах 5 л, 10 л.

ПРИНЦИП МЕТОДА: Гистологический формалин 10 % обеспечивает длительное хранение тканей (12 месяцев) без снижения способности клеток в последующем воспринимать окраску. Гистологический формалин 10 % применяется для исследования срезов, небольших кусочков тканей. Гистологический формалин 10 % за счет соответствия осмотического давления и pH в реагенте и внутри клетки предотвращает «слипание» клеток, уменьшает сжатие цитоплазмы и ядер.

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Наименование показателя Норма

1. Внешний вид, цвет при плюс 20 °С Бесцветная прозрачная жидкость без посторонних примесей; при хранении допускается образование мути или белого осадка параформальдегида, растворимого при температуре не выше 40 °С

2. Запах Резкий, формальдегидный

3. Физико-химические характеристики

3.1. pH при 25°С 7.2-7.4

3.2. Плотность при 20°С, г/см3 От 1,005 до 1,015

3.3. Массовая доля формальдегида, %, не более 4,0

4. Функциональные характеристики

4.1. Равномерное уплотнение и изменение цвета на поверхности и на контрольном срезе образца ткани, за время фиксации 5 часов. соответствует

4.2. Окраска клеток ядер клеток ткани гематоксилином Карацци через 5 часов после помещения образца в гистологический формалин 10%, цвет От темно-синего до фиолетового

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

При работе с гистологическим формалином 10% следует соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», Москва, 1981 г. При операциях с гистологическим формалином 10 % следует пользоваться резиновыми перчатками по ГОСТ 20010 и специальной лабораторной одеждой, так как образцы биологических материалов следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В или любой другой возбудитель вирусной инфекции. Надлежит избегать контакта гистологического формалина 10% с кожей, глазами и слизистыми, а также его разливания или случайного заглатывания при пипетировании. В случае повреждения упаковки реагент смыть большим количеством воды, при попадании на кожу смыть большим количеством воды, в случае заглатывания при пипетировании вызвать рвоту, при плохом самочувствии обратиться к врачу. Контроль биозагрязнений в лаборатории — по ГОСТ ИСО 14698. Химическая посуда и оборудование, используемые при работе с гистологическим формалином 10%, должны быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно. Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в помещениях, предназначенных для работы с гистологическим формалином 10%. При аварийном разливе гистологического формалина 10% необходимо эвакуировать всех сотрудников из помещения, открыть окна и включить вытяжки. Залить область разлива примерно одинаковым количеством 2% водного раствора аммиака и выйти из помещения на 15…20 минут. Затем собрать жидкость с применением адсорбирующего материала, вымыть полы мыльным раствором и после — водой, работая в противогазе, перчатках и фартуке.

ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

— микротом санный или ротационный;

— цилиндр мерный вместимостью 200-250 мл, 2-й класс точности (ГОСТ 1770);

— колба коническая с притертой пробкой вместимостью 100 мл (ГОСТ 1770);

— пробирка центрифужная вместимостью от 10 до 12 мл градуированная (ГОСТ 1770).

Дополнительные материалы и принадлежности:

— кассеты для гистологической проводки;

— палочка стеклянная или одноразовый шпатель;

— резиновые перчатки (ГОСТ 20010).

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ПРОБЫ

— анализируемый биологический материал человека: биологическая ткань, кал;

— сбор биологического материала (биологическая ткань) производится в сухой нестерильный пластиковый контейнер;

-допускается сбор биологической ткани непосредственно в контейнер с гистологическим формалином 10 %;

— предварительная обработка анализируемых проб биологического материала не производится.

Срок хранение анализируемых проб в гистологическом формалине 10 % при температуре от 18 до 25 °С составляет 12 месяцев.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧИХ РАСТВОРОВ

Гистологический формалин 10 % поставляется в готовом к применению виде.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

1. ФИКСАЦИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ТКАНИ

1.1. В колбу коническую с притертой пробкой вместимостью 100 мл отмерить мерным цилиндром гистологический формалин 10 % в объеме, превышающем в 20 раз объем фиксируемого биологического материала.

1.2. Приготовить образец ткани толщиной около 10 мм. Длина и ширина образца должна быть такой, чтобы при помещении образца в емкость для фиксации не образовывалось складок и наложения ткани. Рекомендуется использовать специальные кассеты для гистологической проводки.

1.3. Недопустимо обмывание образцов водой перед погружением их в фиксирующую среду.

1.4. Поместить образец ткани в гистологический формалин 10 % сразу после взятия. Допускается сбор биологического материала непосредственно в контейнер, содержащий гистологический формалин 10 %. Инкубировать при комнатной температуре (18- 25°С). Время инкубации для образцов толщиной менее 5 мм не менее 5 часов, для образцов толщиной от 5 мм до 1 см — 24-48 часов. Не рекомендуется использовать образцы толщиной более 1 см.

1.5. Допускается в одной емкости проводить фиксацию нескольких образцов при условии соблюдения соотношения объема гистологического формалина 10 % к суммарному объему образцов 20:1, при отсутствии наложения образцов друг на друга.

1.6. Запрещается повторное использование гистологического формалина 10 % для фиксации образцов.

1.7. Критерием достаточной фиксации служит равномерное уплотнение объекта и одинаковый вид его как с поверхности, так и на контрольном разрезе. Если проводится серия опытов, следует один и тот же орган фиксировать одинаковое количество времени (не рекомендуется сравнивать исследуемый материал, фиксируемый в течение 24 часов, с материалом, подвергающимся фиксации в течение 2-х недель).

1.8. После фиксации объекты могут быть залиты в парафин, целлоидин или порезаны на замораживающем микротоме без дополнительной обработки или согласно инструкции прибора, с дальнейшим исследованием по различным методикам.

2. ХРАНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ТКАНИ

1.1. — 1.8. настоящей инструкции. Образец хранить не более 12 месяцев при комнатной температуре (18-25°С) и относительной влажности 40…80 %. Не допускается воздействие прямых солнечных лучей.

ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ ПО ВНУТРЕННЕМУ КОНТРОЛЮ КАЧЕСТВА

Определение массовой доли формальдегида в гистологическом формалине 10 % проводится по % ГОСТ 1625. Проверка pH гистологического формалина 10 % производится по ГОСТ 32385. Проверка функциональных характеристик производится путем окраски образцов ткани Гематоксилином Карацци с использованием зарегистрированных в установленном порядке наборов реагентов для диагностики «ин витро» в соответствии с инструкцией по применению, прилагающийся к соответствующим реагентам.

УТИЛИЗАЦИЯ

1. Изделия, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истечением срока годности, подлежат утилизации.

2. Уничтожение изделий осуществляется организациями, имеющими соответствующую лицензию, на специально оборудованных площадках, полигонах и в помещениях в соответствии с требованиями, предусмотренными существующими Федеральным законам, и с соблюдением обязательных требований по охране окружающей среды.

3. Использованные изделия перед уничтожением дезинфицируют и складируют в контейнеры или пакеты для сбора отходов класса Б и утилизируют в соответствии с требованием СанПиН 2.1.7.2790.

4. Удалять неиспользованный при исследованиях гистологический формалин 10% и другие реактивы следует в соответствии с СП 2.1.7.1386 и СанПиН 2.1.7.2790; указания к работам по дезинфекции оборудования и помещений — по ОСТ 42-21-2 и МУ 287-113.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ

1. Гистологический формалин 10 % должен храниться при температуре 18 — 25 °С и относительной влажности 40…80 % в течение всего срока годности. Не допускается воздействие прямых солнечных лучей. Гарантийный срок хранения в упаковке — 24 месяца.

2. Гистологический формалин 10 % после вскрытия можно хранить в течение всего срока годности, при условии плотного закрытия флаконов, при температуре 18 — 25 °С и относительной влажности 40…80 %. Не допускается воздействие прямых солнечных лучей. Гарантийный срок хранения после вскрытия упаковки составляет — 24 месяца.

3. Транспортирование гистологического формалина 10% осуществляется всеми видами крытого транспорта в соответствии с правилами перевозки грузов, действующими на данном виде транспорта, при температуре плюс 0-30°С и относительной влажности 40-80 % в условиях, исключающих действие агрессивных сред, прямых солнечных лучей и влаги. Допускаются механические воздействия в течение 5 суток: вибрационные нагрузки в диапазоне частот 10-55 Гц, амплитуда перемещения 0,35 мм; ударные нагрузки — пиковое ударное ускорение м/с — 2(g) 100 (10), длительность действия ударного ускорения 16 м/с.

4. Срок годности гистологического формалина 10 % составляет 24 месяцев. По истечению срока годности гистологический формалин 10% применению не подлежит.

ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ

Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие качества формалина требованиям Технических условий при соблюдении правил использования, транспортирования и хранения.

Источник